安捷伦1100液相的维护

1.判断仪器脱气机是否正常:打开purge阀,流速设为2ml/min,然后提起过滤头,让体系进一些空气,再放下过滤头,看气泡是否会减少来判断脱气机是否起作用;
2.溶剂过滤头不可超声清洗,可用35%硝酸浸泡1小时后再用溶剂清洗;
3.EDTA、乙二胺四乙酸等会对液相柱的不朽钢产生腐蚀;四氯化碳与2-异丙醇、四氢呋喃不可混合使用,但可单独使用;
4.溶剂的使用:每两天更换或重新过滤溶剂(尤其是水,需要每天更换);流动相过滤是为了去除微生物,一般水要放在棕色瓶中;
5.判断purge阀的滤芯是否需更换:用水作流动相时,流速为5ml/min时,正常泵压应为0bar(若打开purge阀时,泵压超过10bar时需更换滤芯);
6.若用非极性溶剂作流动相,则需更换泵中起密封作用的“黑草帽”(适合反相的材料为石墨+聚四氟乙烯,而适合正相的为 ),而且必须一对同时更换,否则损坏更快;
7.密封垫的冲洗:当流动相中盐的浓度大于0.01M时,可减少密封垫的磨损;用1%异丙醇溶液冲洗活塞杆中析出的盐(加异丙醇是为了防止细菌生长),流速设为3-5滴/min;泵开着,洗盐装置也须开着;
  8.泵头不可用超声清洗(可用乙醇、水清洗)、宝石杆不可超声,石英窗可用超声清洗;
  9.缓冲盐的通道放在比例阀的下面,只有两相的话,只用一边(盐在下面,有机相在上面);
  10.双元泵为泵后混合方式(为高压混合方式,不易进气泡),而四元泵为低压混合方式;
  11.出口球型阀(outlet ball valve)可用超声清洗;
  12.双元泵有一个筛网(sieve)可控制低流速;
  13.流动相使用了缓冲盐,则必为反相柱(不可长时间用水冲),一般可冲20-30min,然后加入有机相(如甲醇),浓度逐步加大,直至100%甲醇;
  14.反相和正相转换时,一般要做溶剂过渡(最佳为异丙醇),因为粘度大,流速不可设太大,不要超过1ml/min(完全置换原来溶剂所需溶剂体积=体系体积(柱体积+1.5ml)×5);
  15.比例阀内漏:抬起有嫌疑的通路,看管内流动相体积是否减少(抬起时同时打开purge阀);
  16.泵压力不正常可能原因:气泡、主动阀故障、出口阀故障、密封垫或柱塞杆磨损,渗漏或堵塞、比例阀故障、传感器故障、使用比例阀混合时盐浓度太高;
  17.自动进样:旁路状态、主路状态;手动进样:load状态至inject状态(最好满刻度进样,建议吸3倍以上进样体积),小体积进样则以小于1/2进样阀体积为佳;平时进样阀最好保持在inject状态(最右边状态);
  18.进样流程:插针——inject状态——load状态——进样(缓慢)——inject状态——拔出针(进样阀后有两根废液管);
  19.VWD(可变波长)检测器:检测器后out废液管不可太短,否则流通池容易进气泡,也不可太长,否则易压碎流通池;
  20.DAD检测器(优势为优化条件方便):最大波长选择——要选择溶剂没有吸收的位置(避开约20nm);VWD检测器的灵敏度略高于DAD检测器;滤光片中钬玻璃用于校准波长;若要检测器的灵敏度提高则要开大狭缝(二极管阵列前狭缝默认为4nm);
  21.DAD检测器的氘灯可用于VWD检测器,但反之则不行;钨灯、氙灯寿命长,可随开随用,但“氘灯需要预热(10几分钟)(寿命为1000小时),1-2小时不用,不用关,还是开着更好,氘灯放时间长容易衰变”,灯可进行测试;
  22.测定条件设定:reference wave(流动相中溶剂的吸收)可以不设,梯度洗脱时参考波长要设,否则会导致基线漂移,DAD可选一个样品没吸收的波长作为参考光;band width(VWD设为光谱的半谱带宽度,而DAD检测器则不用设)(此范围内作色谱图可降低噪音,信噪比更好,但信号会降低);参考波长选择原则:样品没有吸收,但靠近样品最大吸收的位置;参考光波长带宽必须大于或等于测量光波长带宽;DAD选条件时要存所有光谱图(spectrum);氘灯(190-800nm),但有效范围为190-600nm,钨灯(470-950nm),若用470-800nm时两灯同开则强度加大;
  23.基线噪音大原因:泵压不稳、有气泡、柱污染;
  24.清洗在线脱气机及比例阀(尤其是长期使用水相或缓冲盐的通路):先用水冲洗,再用甲醇冲洗,可以打开purge阀,使用5ml/min的流速,也可用IPA清洗:A、Buffer B、MeoH C、Water D、CH3CN 分析:A=20:
  25.流动相大于9.5或小于2.3时,进样阀应更换tefzel转子密封,可耐受压:VWD(40bar),MWD(120bar), FLD(20bar), RID(56bar);RID,FLD永远是最后一个检测器;
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