人白介素4(IL-4)ELISA试剂盒实验操作
仪器信息网 · 2011-02-25 00:12 · 39414 次点击
1.采用双抗体夹心法测定标本中人白介素4(IL-4)ELISAKit水平。
2.首先用纯化的人白介素4(IL-4)ELISAKit体包被微孔板,制成固相抗体。
3.然后往包被单抗的微孔中依次加入白介素4(IL-4)ELISAKit,再与HRP标记的白介素4(IL-4)ELISAKit抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
4.颜色的深浅和样品中的白介素4(IL-4)ELISAKit呈正相关。
5.最后用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算出样品中人L白介素4(IL-4)ELISAKit浓度。
目的:测定人的血清,血浆及相关液体样本中白介素4(IL-4)ELISAKit的含量。
6.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。
7.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)去除颗粒。仔细收集上清,如有沉淀,再次离心。
安全性:
1.避免直接接触终止液和底物。如不小心接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3.不要用嘴接触试剂盒里的任何成份。
4Elisa试剂盒请远离儿童
自备物品:
1、37℃恒温箱
2、标准规格酶标仪
3、精密移液器及一次性吸头
4、蒸馏水
5、一次性试管
6、吸水纸
保存条件及有效期:
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6个月