摘要：使用K9860自动定氮仪对食品中蛋白质含量进行测定,本文考察了方法的准确性和重现性。实验数据表明,结果令人满意。
关健词：自动定氮仪;食品;蛋白质
UsingAutomaticInstrumentofNitrogentoDetermineProteinInfood
ChengxiaoliangWangyan
(ApplicationlaboratoryofHanon,Shandong,Jinan250101)
Abstract:Thispaperdiscussestheaccuracyandreproducibilityofthemethodhowtodetermintheproteinoffoodwithautomaticinstrumentofnitrogen,Experimentaldatashowsthatthemethodisquickandaccurate.
Keywords:automaticinstrumentofNitrogen;food;protion
1前言
食品中的蛋白质含量是衡量食品品质、营养价值的重要指标，是常规理化检测中必须测定的指标，蛋白质含量测定方法一般来说，有以下五种：凯氏定氮法，双缩尿法(Biuret法)、Folin-酚试剂法(Lowry法)、紫外吸收法和考马斯亮蓝法(Bradford法)。
凯氏定氮法常用于有机化合物中的氮含量的测定，是蛋白质含量测定的经典方法，虽然在测试过程中，试剂用量很大，但是不可否认，它所适用的样品范围广，具有测定结果准确度和精密高度等优点。因此凯氏定氮法是食品分析、营养和生化研究中最广泛测试方法。迄今为止一直作为国内外的标准方法.其基本原理是将食品与硫酸和催化剂一同加热消化,使蛋白质分解,分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。
2材料与方法
2.1仪器与试剂
2.1.1K9860全自动凯氏定氮仪。
2.1.2样品消解装置SH520石墨消解仪。
2.1.3硫酸(密度1.8419g/mL)。
2.1.4硫酸钾。
2.1.5硫酸铜(CuSO4·5H2O)。
2.1.6硼酸溶液(20g/L)。
2.1.7氢氧化钠溶液(400g/L)。
2.1.8硫酸标准滴定溶液或盐酸标准溶液。
2.1.9混合指示剂：1份甲基红乙醇溶液(1g/L)与5份溴甲酚绿乙醇溶液(1g/L)临用时混合。
2.2测定方法
称取或移取适量样品放入消化管，加入0.2g硫酸铜，6g硫酸钾及20mL硫酸，稍摇匀后，把消化管放入消解仪，采用直线升温方式(若样品易起泡，建议采用曲线升温方式)，将样品消化呈透明蓝绿色液体后，再继续消化0.5-1h。取下放冷，将消化管放入K9860全自动凯氏定氮仪，设置好相应参数，仪器自动蒸馏、滴定、计算并打印结果。
3结果与讨论
3.1精密度测定
取蛋白质含量不同的5种样品,每一种样品平行测定6次，结果见表1，测定结果的相对标准偏差(RSD)均小于2%,表明K9860全自动凯氏定氮仪的精确度良好。
表1仪器精密度测定样品名称蛋白质含量(g/100g)平均值(g/100g)相对标准偏差(RSD%)
豆浆1.901.911.921.921.03
1.921.931.92
酸奶0.760.750.740.751.05
0.730.740.75
纯牛奶3.203.223.213.211.21
3.203.233.22
市售奶粉25.1225.1425.1125.131.22
25.1225.1425.12
即食海参76.2076.2276.2376.221.60
76.2276.2076.24
3.2准确度测定
蛋白质含量不同的5种样品，进行加标(硫酸铵)回收试验，结果见表2，硫酸亚铁铵的回收率在99%以上,表明K9860全自动凯氏定氮仪准确度良好。
表2仪器准确度测定
样品含氮量(mg)加标量(mg)总氮量(mg)测得总氮量(mg)回收率(%)
130.0212.0042.0241.9699.9
215.4225.0240.4440.3699.8
37.9128.1236.0335.9399.7
425.0225.0850.1050.20100.1
530.1430.2060.3460.2099.8
3.3方法对比
用K9860全自动凯氏定氮仪和经典的凯氏定氮法分别对5种样品测定其蛋白质含量，结果见表3，结果表明，两种方法对同一样品的测定结果无差异显著性(t=1.0,P>0.05)。
表3两种方法对比试验仪器法经典凯氏定氮法
11.151.13
22.752.79
320.2820.32
440.4540.49
579.2279.18
4.小结
由上述实验结果,我们看出K9860全自动凯氏定氮仪具有操作简便快速、省时省力准确度高、精密度高等特点。它与经典的凯氏定氮法作比较，测定食品中蛋白质含量，结果令人满意。
5.参考文献
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