故障
可能原因
解决方法
（一）保留时间变化
1柱温变化
柱恒温，必要时需配置恒温箱
2等度与梯度间未能充分平衡
至少用10倍柱体积的流动相平衡柱
3缓冲液容量不够
用>25mmol/L的缓冲液
4柱污染
每天冲洗柱
5柱内条件变化
稳定进样条件，调节流动相
6柱快达到寿命
采用保护柱
（二）保留时间缩短
1流速增加
检查泵，重新设定流速
2样品超载
降低样品量
3键合相流失
流动相PH值保持在3~7.5检查柱的方向
4流动相组成变化
防止流动相蒸发或沉淀
5温度增加
柱恒温
（三）保留时间延长
1流速下降
管路泄漏，更换泵密封圈，排除泵内气泡
2硅胶柱上活性点变化
用流动相改性剂，如加三乙胺，或采用碱至钝化柱
3键合相流失
同前（二）3
4流动相组成变化
同前（二）4
5温度降低
同前（二）5
（四）出现肩峰或分叉
1样品体积过大
用流动相配样，总的样品体积小于第一峰的15%
2样品溶剂过强
采用较弱的样品溶剂
3柱塌陷或形成短路通道
更换色谱柱，采用较弱腐蚀性条件
4柱内烧结不锈钢失效
更换烧结不锈钢，加在线过滤器，过滤样品
5进样器损坏
更换进样器转子
（五）鬼峰
1.进样阀残余峰
每次用后用强溶剂清洗阀，改进阀和样品的清洗
2.样品中未知物
处理样品
3.柱未平衡
重新平衡柱，用流动相作样品溶剂（尤其是离子对色谱）
4.三氟乙酸（TFA）氧化（肽谱）
每天新配，用抗氧化剂
5.水污染（反相）
通过变化平衡时间检查水质量，用HPLC级的水
（六）基线噪声
1气泡（尖锐峰）
流动相脱气，加柱后背压
2污染（随机噪声）
清洗柱，净化样品，用HPLC级试剂
3检测器灯连续噪声
更换氘灯
4电干扰（偶然噪声）
采用稳压电源，检查干扰的来源（如水浴等）
5检测器中有气泡
流动相脱气，加柱后背压
（七）峰拖尾
1柱超载
降低样品量，增加柱直径采用较高容量的固定相
2峰干扰
清洁样品,调整流动相
3硅羟基作用
加三乙胺，用碱致钝化柱增加缓冲液或盐的浓度，降低流动相PH值，钝化样品
4同前（四）4
同前（四）4
5同前（四）3
同前（四）3
6死体积或柱外体积过大
连接点降至最低，对所有连接点作合适调整，尽可能采用细内径的连接管
7柱效下降
用较低腐蚀条件，更换柱，采用保护柱
（八）峰展宽
1进样体积过大
同（四）1
2在进样阀中造成峰扩展
进样前后排出气泡以降低扩散
3数据系统采样速率太慢
设定速率应使每峰大于10点
4检测器时间常数过大
设定时间常数为感兴趣第一峰半宽的10%
5流动相粘度过高
增加柱温，采用低粘度流动相
6检测池体积过大
用小体积池，卸下热交换器
7保留时间过长
等度洗脱时增加溶剂含量也可用梯度洗脱
8柱外体积过大
将连接管径和连接管长度降至最小
9样品过载
进小浓度小体积样品