以乙酸胺盐溶液和乙腈提取样品中的孔雀石绿和无色孔雀石绿后，经过液一液萃取，固相萃取，用接有氧化柱的C18柱进行高效液相色谱分析，外标法定量。5、试剂5.1所有试剂应无干扰峰，应选择优级纯或色谱纯的试剂，分析纯试剂应重蒸。5.2孔雀石绿及无色孔雀石绿标准品：孔雀石绿纯度≥90％，无色孔雀石绿纯度≥90％。5.3乙腈：色谱纯。5.4二氯甲烷：分析纯。5.5盐酸羟胺溶液：0.25g/mL。5.6二甘醇：分析纯。5.7乙酸铵溶液：0.1mol/L(pH4.5)，0.125mol/L(pH4.5)。5.8对甲苯磺酸溶液：0.05mol/L。5.9碱性氧化铝：分析纯，粒度0.071mm～0.1501nrn。5.10中性氧化铝：分析纯，粒度0.07mm～0.150mm。5.11丙基磺酸阳离子树脂：PRS(propylsulfonicacid)，40μm。5.12孔雀石绿标准溶液：准确称取孔雀石绿0.1000g，用乙腈溶解，定容于100mL容量瓶中，使成浓度为1mg/mL的标准溶液，再用乙腈稀释成0.1lμg/mL的工作溶液。该溶液应避光保存。5.13无色孔雀石绿标准溶液：准确称取无色孔雀石绿0.1000g，用乙腈溶解，定容于100mL容量瓶中，使成浓度为1mg/mL的标准溶液，再用乙腈稀释成0.1μg/mL的工作溶液。该溶液应避光保存。5.14二氧化铅：分析纯。5.15硅藻土：精制工业硅藻土。5.16水：应符合GB/T6682的要求。6、仪器6.1高效液相色谱仪：配可变波长检测器。6.2电子天平：感量0.0001g。6.3匀浆机。6.4离心机。6.5振荡器。6.6旋转蒸发器。6.7固相萃取柱：PRS柱，中性氧化铝柱。6.8色谱柱:C18柱。6.9柱后氧化柱:柱内填料:二氧化铅:硅藻土=1∶1。