抗真菌药敏纸片的使用

  仪器信息网 ·  2011-03-24 00:03  ·  32398 次点击
1.抗真菌药敏纸片分类和名称
类别
中文名称
英文名称
缩写
剂量
多烯类
两性霉素B
AmphotericinB
AMB
10ug
制霉菌素
Nystatinum
NYS
50ug
吡咯类
咪唑类
咪康唑/达克宁
Miconazole
MIC
10ug
益康唑
Enconazole
ECO
10ug
酮康唑
Ketoconazole
KET
15ug
克霉唑
Clotrimazole
CLO
10ug
三唑类
氟康唑
Fluconazole
FLU
15ug
伊曲康唑
Itraconazole
ITC
8ug
其他
5-氟胞嘧啶
5-Flurocytosine
FC
1ug
抗真菌药敏专用NCCLS推荐的RPMI-1640平板
9cm
注:纸片直径9.2mm,30片/支,2-8℃保存,效期见包装。
2.接种液的配制和接种
接种液的配制中,菌液浓度的控制是重要的,过浓会导致吡咯类抑菌圈判定困难出现假阴性。
对于大多数菌株,菌液浓度调成0.5麦氏浊度即可;克柔念珠菌应再稀释5倍;隐球菌属调成1.0麦氏浊度。
用无菌棉拭子沾取菌悬液,略挤压,直接均匀涂布平板,最后沿平皿周边绕两圈,保证涂布均匀。然后,平皿放35℃开盖倒扣干燥15分钟,须待平板上的水分被琼脂完全吸收后再贴纸片。纸片贴上后用镊尖压一下,使其贴平。建议9cm平皿一般贴直径9.2cm的药敏纸片4-5个。
3.培养
在多数情况下,30-35℃培养18-24小时后马上测量抑菌圈,时间过长会使抑菌圈变小而导致假耐药。如果生长不好,抑菌圈不清(如:新型隐球菌)可适当延长培养时间至抑菌圈清晰为止。
4.判读标准
中文名称
敏感(S)
中介(I)
耐药(R)
两性霉素B(10ug)
≥15mm
10-14mm
<10mm
制霉菌素(50ug)
≥15mm
10-14mm
<10mm
咪康唑/达克宁(10ug)
≥20mm
12-19mm
≤11mm
益康唑(10ug)
≥20mm
12-19mm
≤11mm
酮康唑(15ug)
≥20mm
12-19mm
≤11mm
克霉唑(10ug)
≥20mm
12-19mm
≤11mm
氟康唑(15ug)
≥20mm
12-19mm
≤11mm
伊曲康唑(8ug)
≥15mm
10-14mm
<10mm
5-氟胞嘧啶(1ug)
≥20mm
12-19mm
≤11mm
注:
l对于多烯类抗真菌药(AMB和NYS),测量生长清晰的抑菌圈,抑菌圈内出现的菌落必须视为耐药突变株。
l对于吡咯类抗真菌药(FLU、ITC、MIC、ECO、KET、CLO),在抑菌圈内可能会出现较小的部分被抑制的菌落。测量时以正常生长的菌落形成的抑菌圈为准,其内部的较小菌落不应视为突变株。
l对于5-氟胞嘧啶(FC),测量生长清晰的抑菌圈,抑菌圈内出现的菌落通常为耐药突变株。
l抗真菌药敏平板必须使用NCCLS推荐的RPMI-1640平板。使用其它平板可能会使FC无抑菌圈或抑菌圈减小。其它抗真菌药敏的抑菌圈也有不同程度的改变。

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