不同物质对不同波长入射光的吸收程度各不相同，从而形成特征性的吸收光谱。分光光度法不仅适应于可见光区，同时还可扩展至紫外光区及红外光区，因此给科研实验带来了极大方便。下面重点介绍分光光度计的使用及注意事项。
使用规则
1.接通稳压器电源，待稳压器输出电压稳定至200V后打开光度计电源，仪器自动进入初始化。
2.初始化约需时10min，内容包括：①寻找零级光;②建立基线;③最后当显示器指示××nm时，，表明仪器完成初始化程序，可进入检测状态。
3.按要求输入各项参数，选择相应比色杯(玻璃或石英)，将空白管、标准管及待测管依次放入比色皿架内，关上比色池盖。
4.以空白管自动调零。
5.试样槽依次移至样品位置，待数据显示稳定后按“START/STOP”键，打印机自动打印所测数据，重复上述步骤，直到所有样品检测完毕。
6.检测结束后应及时取出比色杯，并清洗干净放回原处，同时关上仪器电源开关及稳压器电源开关，做好使用情况登记。
注意事项
1.仪器初次使用或使用较长时间(一般为一年)，需检查波长准确度，以确保检测结果的可靠性。
2.由于长途运输或室内搬运可能造成光源位置偏移，导致亮电流漂移增大。此时对光源位置进行调整，直至达到有关技术指标为止。若经调整校正后波长准确度、暗电源漂移及亮电流漂移三项关键指标仍未符合要求，则应停止使用，并及时通知有关技术人员检修。
3.每次检测结束后应检查比色池内有否溶液溢出，若有溢出应随时用滤纸吸干，以免引起测量误差或影响仪器使用寿命。
4.仪器每次使用完毕，应于灯室内放置数袋硅胶(或其它干燥剂)，以免反射镜受潮霉变或沾污，影响仪器使用，同时盖好防尘罩。
5.仪器室应通常保持洁净干燥，室温以5-35℃为宜，相对温度不得超过85%。有条件者应于室内配备空调机及除湿机，以确保仪器性能稳定。
6.仪器室不得存放酸、碱、挥发性或腐蚀性等物质，以免损坏仪器。
7.仪器长时间不用时，应定时通电预热，每周1次，每次30min，以保证仪器处于良好使用状态。