PriCells-免疫荧光技术简介
仪器信息网 · 2011-03-24 00:49 · 28292 次点击
PriCells-免疫荧光技术简介
免疫荧光技术简介
PriCells-免疫荧光技术(Immunofluorescencetechnique)
1941年,Coons等于首次采用荧光素进行标记而获得成功。这种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术(fluorescentantibodytechnique)。该技术的主要特点是:特异性强、敏感性高、速度快。主要缺点是:非特异性染色问题尚未完全解决,结果判定的客观性不足,技术程序也还比较复杂。
一、荧光免疫技术的概念:
免疫荧光技术(Immunofluorescencetechnique)又称荧光抗体技术,是标记免疫技术中发展最早的一种。将抗原或抗体用荧光素进行标记,标记的抗原或标记的抗体与相应的抗体或抗原反应后,测定复合物中的荧光素,这种免疫技术称为免疫荧光素技术。免疫荧光细胞化学分直接法、夹心法、间接法和补体法。
二、荧光免疫技术分类:
(1)荧光抗体显微镜技术:抗原抗体反应后,利用荧光显微镜判定结果的检测方法。
(2)免疫荧光测定技术:抗原抗体反应后,利用特殊仪器测定荧光强度而推算被测物浓度的检测方法
三、荧光的产生:
物质吸收外界能量而进入激发状态,在回复基态时多余的能量以电磁辐射的形式释放,即发光,这种光称为荧光。这种物质,称为荧光素。由光激发所引起的荧光,为光致荧光;由化学反应所引起的荧光,为化学荧光。
四、荧光素的荧光特性:
(1)停止供能,荧光现象随即终止
(2)对光的吸收和荧光的发射具高度选择性入射光波长