防细菌滤膜的网孔的直径为0.45微米以下，当溶液通过滤液后，细菌的细胞和真菌的孢子等因大于滤膜直径而被阻，在需要过滤灭菌的液体量大时，常使用抽滤装置;液量小时，可用注射器。使用前对其高压灭菌，将滤膜装在注射器的靠针管处，将待过滤的液体装入注射器，推压注射器活塞杆，溶液压出滤膜，从针管压出的溶液就是无菌溶液。
过滤除菌操作步骤：首先将过滤器、接液瓶用纸包好，滤膜可放在培养皿内用纸包好。使用前先经121℃高压蒸汽灭菌30分钟;在超净工作台上，将滤器装置装好，用灭菌无齿镊子将滤膜安放在隔板上，滤膜粗糙面向上;然后将待除菌的液体注入滤器内，开动真空泵即可过滤除菌。滤液经培养证明无菌生长后可保存备用。
一定要采用质量好的膜，滤纸一定要安装平整，滤纸四周受的张力要均匀，不能有褶皱，你可以一次过滤500ml，免得压力太大，同时负压吸力不要开太大，我以前用的是象呼吸科用的呼吸器，手工挤压
安装:
0.22um放下面,上面放0.45um,光面向上,(不过没感觉光面向上或者向下有什么不同的结果).安装滤器的时候旋钮不要过紧,对角方向逐渐加压.如过紧高温膨胀可能会损坏滤膜.
高压:
高压之前要使滤膜湿润,可从进液口滴如少许超纯水,高压之后不可放入烤箱干燥.
过滤:
过滤之前一定要把旋钮拧紧,对角方向逐渐加压.每次放入滤器中的液体不要超过收集瓶的容积,否则液体流下过快而来不及更换瓶子会溢出.压力泵一般没有可调节的,所以需要一个人看着压力泵,压力超过0.2mPa的时候立即切断电源,压力下来的时候在给电.