八角(1lliciumverulTbHook.￡)为木兰科八角属植物，又称大茴香、八角茴香、大料，我们采用HPLC法对八角进行莽草酸含量的测定。
1实验材料、仪器、方法与试剂
1.1实验材料
莽草酸对照品为本实验室自制，鉴定莽草酸纯度达99.06%。八角茴香果样品由采购于药材市场进经鉴定
1.2实验仪器
SSI液相色谱及检测器;LabAlliance
1.3试剂及色谱条件
甲醇、乙腈为色谱纯，磷酸为AR，水为实验室自制去离子水。
C18色谱柱(250×46mm，5I.zm);流动相为甲醇：0.1%的磷酸水(98：2);流速1.0mL/min;检测波长210am。
1.4试验方法
1.4.1标准溶液的配制称取草酸对照样品0.0625g，用纯净水定容至50mL，配成浓度为1.25×10g/mL的莽草酸标准溶液。
1.4.2标准曲线的绘制精密吸取标准样品溶液1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0mL，分别用纯净水定容至50mL。吸取各浓度标准样品溶液20分别进样，测定色谱峰峰面积，并以色谱峰峰面积对对照样品的浓度回归，得回归方程为Y=3E+IOX+48631，r=0.9997，其线性范围为2.5×1O一～2.5×10一g/mL。
1.4.3样品溶液的制备取约等于2～3g干重的鲜果，粉碎后置于锥形瓶中，加入150mL去离子水，在已预热至98℃的水浴锅内保温2.5h后，将提取液进行减压抽滤，再加入150mL的去离子水于锥形瓶中，放入98℃的水浴中保温2.5h后，对提取液减压抽滤，最后合并2次提取液。待液体冷却至室温后定容至1000mL，摇匀并吸取20mL置于100mL容量瓶中，稀释至刻度，摇匀。用0.45滤膜过滤，作为样品溶液。
2结果与分析
2.1样品莽草酸含量
准确吸取对照样品溶液和各样品供试液20，分别注入高效液相色谱仪，测定色谱峰峰面积，计算含量，结果见表1。莽草酸标准品溶液及样品溶液的HPLC色谱图见图1。
如图1所示，A为莽草酸标准样品溶液的HPLC图谱，B为某产地的八角果样品溶液的HPLC图谱。其中A图中4.258的峰和B图中4.292的峰都是色谱所检测出莽草酸的峰，可以看出实验所设条件使莽草酸色谱峰与其他组分达到良好分离，基线较平稳。
实验对11个产地同一品种的11个八角茴香果样品进行了测定，结果表明，样品中的莽草酸含量均在6.2%以上(各样点均为混合样平均值)。各个样点的同一品种八角茴香果中莽草酸含量存在较明显的差异。
2.2精密度试验
准确吸取莽草酸对照品溶液20，重复进样6次，按1.3的色谱条件测定莽草酸峰面积并计算RSD值，结果RSD为0.64%。表明仪器和色谱条件均具有良好的精密度。
2.3稳定性试验
准确吸取同一样品溶液，在0、2、4、6、8h各进样一次，按1.3的色谱条件测定莽草酸峰面积并计算RSD值。结果RSD为0.61%。表明样品溶液在8h内稳定。
2.4重复性试验
准确称取同一批样品5份，按3.2样品溶液的制备方法及2.1项进行含量测定，并计算RSD值。结果RSD值为0.38%，重复性良好。
2.5加样回收率试验
称取已知含量样品6份，分别加入莽草酸标准品约8mg，然后按照1.4.3的样品溶液制备方法制备样品并进行含量测定，结果见表2。其平均回收率为98.22%，RSD为1.04%，符合分析要求。