1.概述
MC99-2(3)自动核酸蛋白(液相色谱)分离层析仪是我公司在MA、MB系列分离层析仪基础上，采用琴式结构一体化设计，大大缩小了仪器的体积，减小仪器在实验室的占用面积，使整套仪器配置性能、可靠性得到很大的提高，并解决了在调试过程中繁琐的连接问题，提高了工作效率。本产品具有较高的性价比，是实验室理想的更新换代新产品。
本产品可广泛应用于生物学研究、药物测定、农业科研、化工、食品及医疗等领域，是科研和生产活动中必备的仪器设备之一。
2.主要技术参数
2.1梯度混合器(磁力搅拌)
2.1.1转速：0-1250转/分(无级调速)
2.1.2容量：给出梯度1000ml;梯度形状可直线
2.2恒流泵
2.2.1流量：1-4800ml/h
2.2.2压力：3kg/cm
2.3检测仪
2.3.1检测波长：254、280nm(MC99-2)
220、254、280、340nm(MC99-3)
2.3.2流动样品池容积：10ml
2.3.3样品池流速：(1-10)ml/分
2.3.4输出记录仪信号：(1-10)mV
2.4收集器
2.4.1收集试管：12ml×100支
2.4.2定时范围：1秒-99分59秒(MC99-2)
1秒-199小时59分59秒(MC99-3)
2.4.3定滴范围：1-9999滴(MC99-3)
2.4.4定峰范围：1%-100%(MC99-3)
2.5工作条件
2.5.1工作电源：AC220V±10%;50Hz
2.5.2使用环境：温度0-35℃;相对湿度85%
3.各键功能
3.1梯度混合器各键功能
3.1.1“启动”键：接通或关闭梯度混合器电源。
3.1.2“调速”旋钮：调节梯度混合的搅伴速度。
3.2恒流泵各键功能
3.2.1MC99-2
3.2.1.1“启动”键：接通或关闭恒流泵电源。
3.2.1.2“调速”旋钮：调节流量大小(此旋钮带锁，向右下按为锁紧)。
3.2.1.3“换向”键：控制输液方向。
3.2.2MC99-3
3.2.2.1“启动/停止”键：接通或关闭恒流泵电源。
3.2.2.2“排气”键：用于快速排放管子中的空气。
3.2.2.3“▽”键：减速键。
3.2.2.4“△”键：加速键。
3.2.2.5“”键：换向键，用于控制输液方向。
3.2.2.6“倍速循环”键，用于快速加速或减速。
3.3检测仪各键功能
3.3.1“调T”旋钮：选择“灵敏度”为“T”时，可调节“透过率T”为100%。
3.3.2“A调零”旋钮：选择“灵敏度”为(2A-0.05A)时，可调节“吸光度A”为零。
3.3.3“灵敏度选择”键：根据样品出峰大小，选择合适的“灵敏度”。
3.4收集器各键功能
3.4.1MC99-2
3.4.1.1“启动”键：接通或关闭收集器电源。
3.4.1.2“手动/自动”键：按下处于“手动状态”，放开处于“自动状态”。
3.4.1.3“手动”键：按一下试管盘转动一管，按着不放试管盘连续转动，直至报警。
3.4.1.4“报警/换向”键：按下逆时针收集，放开顺时针收集。
3.4.1.5“置位”键：选择定时时间的位置，按一下移动一位。从左至右分别为：十分、分、十秒、秒，闪烁的一位可通过“▲”、“▼”键设置需要的定时数值。
3.4.1.6“▲”键：在数字闪烁时，按此键可增加数值。
3.4.1.7“▼”键：在数字闪烁时，按此键可减少数值。
3.4.2MC99-3
3.4.2.1“启动/停止”键：启动或停止收集器的收集状态。
3.4.2.2“定时”键：定时功能键，按此键可进入定时功能状态。
3.4.2.3“定滴”键：定滴功能键，按此键可进入定滴功能状态。
3.4.2.4“定峰”键：定峰功能键，按此键可进入定峰功能状态。
3.4.2.5“清零”键：按此键可清除光标所在位的字符。
3.4.2.6“确认”键：按此键确认输入的数值。
3.4.2.7“数字”键：通过数字键输入具体数值参数。
3.5后面板各插座功能
3.5.1总电源开关：接通或关闭整机电源。
3.5.2计滴传感器插座：用于连接“计滴传感器”。(MC99-3有此功能)
3.5.3安全阀插座：用于连接“安全阀”。
3.5.4电脑采集器插座：用于连接“电脑采集器”。(MC99-3有此功能)
3.5.5记录仪插座：用于连接“记录仪”。
3.5.6警控插座：用于连接“漏液报警”板。
3.5.7泵控制插座：用于连接“泵控制”插头。(MC99-3有此功能)
4.使用说明
4.1准备工作
4.1.1将竖杆、安全阀、漏液报警板、梯度杯、硅胶管、层析柱、层析柱固定杆、层析柱固定夹、记录议、滤光片按以下要求连接好。
4.1.1.1将“竖杆”插入仪器上面中后部的“竖杆”固定座中，同时旋紧固定螺钉。
4.1.1.2将“安全阀”安装在“竖杆”的上部，高低位置以“横杆”中的硅胶管出口比试管口略高3-6mm为宜，同时将连线插头(四芯)插入仪器后面的“安全阀”插座中。
4.1.1.3将“漏液报警板”放入积液盘(黑色胶木圆盘)的方框中，同时将连接线插头插入仪器后面板的“警控”插座中。
4.1.1.4将“梯度杯”座四脚放在机箱上部右边的四个小圆凹槽内，并将“搅拌磁棒”放入左杯内。
4.1.1.5将“硅胶管”装入恒流泵泵头，先向上拨动“压杆”，使泵头“调整块”上升，把选择好的硅胶管居中放置在滚轮上，向下拨动“压杆”使泵头“调整块”下压压紧硅胶管，并左右向下拉紧硅胶管，再调整泵头两测卡管装置(向内轻按后下压)卡住硅胶管防止转动时管子的窜动。
4.1.1.6将“层析柱固定杆”旋入仪器上部左后角的固定座中，把“层析柱固定夹”安装在固定杆上，上下各一副，同时把“层析柱”固定在层析柱固定夹上，调整好合适高度后，旋紧各自的固定螺钉。
4.1.1.7按“记录仪”随机的说明书要求，安装好记录仪。将“记录仪”连接线一头插入仪器后面的“记录仪”插座中，并旋紧螺帽，另一头接到记录仪“信号柱”上，并请注意“+(红)、-(黑)”极，旋紧接线柱上的螺帽。(用了“记录仪”后，可不用“电脑采集器”)
4.1.1.8在断电状态下，将“滤光片选择器”调整到您所需要的波长。
4.1.2打开“总电源开关”，让检测仪预热30-60分钟。
4.2样品(液体)流向及管路连接
缓冲液体、样品或梯度混合器(右杯)→恒流泵→层析柱进口(上)→层析柱出口(下)→检测仪进口(下)→检测仪出口(上)→安全阀→横杆(MC99-2)或计滴传感器(MC99-3)→收集试管。
4.3系统调试
4.3.1收集器调试(MC99-2)
4.3.1.1试管盘的定位
a.按“启动”键，接通收集器电源。
b.将“手动/自动”键置于手动状态，“顺/逆”键置于“顺”的状态，按“手动”键，使试管架转至顶点﹙此时会报警﹚，然后再将“顺/逆”键置于“逆”的状态，使滴管口在第一根试管的上方，调整滴管口高低、对准中心位置且固定牢。
4.3.1.2设置收集定时时间
a.按下“手动/自动”键，指示灯不亮，仪器处于手动收集状态了。
b.按“置位”键，每按一次移动一个位置，根据您的需要设置定时时间，在闪烁的位置上通过“▲”或“▼”键设置该位的时间(点前二位分别为十分和分;点后二位分别为十秒和秒)。
4.3.1.3自动收集
时间设定完毕后按“手动/自动”键，指示灯亮，仪器进入自动收集状态，收集时间以秒递减至零时，仪器自动转一管，然后重新开始计时，当最后一管收集完毕后仪器会自动报警，等待操作者按“顺/逆”键，解除报警。若在收集过程中由于操作不当而发生漏液现象时，仪器也会自动报警，此时必须关闭电源，排除漏液故障后才能重新开机。
4.3.2收集器调试(MC99-3)
4.3.2.1数据输入
准备状态下(液晶屏显示“上海青浦沪西”及注册商标)，可分别按“定时”、“定滴”、和“定峰”键，进入相应的状态。
a.定时设定：通过“数字”键可对首管参数;未管参数;时、分、秒参数进行设定，按“确认”键，对输入的数字确认，并进入下一参数的设定。按“清零”键，删除上一个输入数据。
若用上次操作的参数，可直接按“启动/停止”键，进入运行状态。
b.定滴设定：同样，通过“数字”键可对首管、末管、定滴参数进行设定(使用该功能时，需配计滴头后方可工作)。
若用上次操作的参数，可直接按“启动/停止”键，进入运行状态。
c.定峰设定：同样，通过“数字”键可对首管、末管、定峰参数进行设定(使用该功能时，也需配计滴头后方可工作)。
定峰参数中“定峰”指所需收集的峰值﹝1%-100%﹞;“长度”指紫外检测仪出口孔至滴管末端之间的长度﹝1-99cm﹞;“管容”指试管的容量﹝1-12ml﹞。
若需重复使用上次设定的参数，则可直接按“启动/停止”键或分别对其参数进行“确认”。
4.3.2.2自动收集
a.定时收集：数据设定完毕，最后一次按“确认”键后，液晶屏显示定时运行画面，即进入定时收集工作状态。在收集过程中，若按“启动/停止”键，则停止定时收集，返回到准备状态。
b.定滴收集：数据设定完毕，最后一次按“确认”键后，液晶屏显示定滴运行画面，即进入定滴收集工作状态。在收集过程中，若按“启动/停止”键，则停止定滴收集，返回到准备状态;在收集过程中，若发生断液报警，需按“启动/停止”键且注入液体后，收集继续进行。
c.定峰收集：数据设定完毕，最后一次按“确认”键后，液晶屏显示定峰运行画面，即进入定峰收集工作状态。收集结束后报警，且显示收集的有效管号。在收集过程中，若按“启动/停止”键，则停止定峰收集，返回到准备状态。
以上正常收集时，收集器滴管口将首先停留在第一管(此时若按“清零”键可返回准备状态)，等待操作者调整滴管口高低，对准第一管中心位置，并固定牢。然后再按“启动/停止”键﹝在液晶屏现管位置后有“↓”闪动状态下﹞，收集器则自动定位到所设定的首管号开始收集，末管号收集完后报警。等待按“启动/停止”键，解除报警，返回准备工作状态。
4.3.3恒流泵调试(MC99-2)
4.3.3.1按“启动”键，接通恒流泵电源。
4.3.3.2将恒流泵的流量调整到系统需要的流量，慢慢调节“调速”旋钮，用量杯测定好您所需的流量后，锁紧“调速”旋钮上的锁紧开关。
4.3.3.3按“换向”键，可改变输液方向，使加液改为抽液，使加压改为抽压。
4.3.4恒流泵调试(MC99-3)
4.3.4.1按“启动/停止”键，接通恒流泵电源。
4.3.4.2在定时、定滴或定峰收集状态下，将恒流泵的转速调整到系统需要的流量转速。
4.3.4.3按“”键，可改变输液方向，使加液改为抽液，使加压改为抽压。
4.3.5梯度混合器调试
4.3.5.1按“启动”键，接通梯度仪电源。
4.3.5.2将梯度仪的调速旋钮调整到适当的混合转速。
4.3.5.3关闭(旋转方向向左)混合输出阀门，将浓缩液倒入右杯，打开(旋转方向向右)混合阀门，让溶液经过通道渗入左杯，立即关闭混合阀门。将另一稀释溶液倒入左杯，使两杯液位相同，然后再打开混合阀门，使两液面保持平衡。
4.3.5.4两杯之间通道内如果存有气泡，应设法将气泡除去后方能使用。
4.3.5.5打开输出阀门，根据需要的斜率，缓慢调节输出流量。
4.3.6检测仪调试
4.3.6.1仪器预热30-60分钟后，可对检测仪进行调试。
4.3.6.2选择“记录仪”信号在10mV，走纸速度(3-6)cm/h(用户根据需要自行掌握)。
4.3.6.3检查检测波长是否正确。
4.3.6.4将“灵敏度”选择为T档，“T”指示灯亮，调节“T”旋钮，使T为“100”(此时透过率“T”为100%，“记录仪”指示在10Mv满刻度)。
4.3.6.5将“灵敏度”选择为0.5A档，“A”指示灯亮(0.5A为常用档，也可选择其它档，视样品出峰大小而定)。调节“A调零”旋钮，使“A”为零(此时吸过度“A”为零，“记录仪”指示在0刻度上)。若有差异，可微调记录仪“调零”旋钮。
4.3.6.6根据实验要求，安装好层析柱，接通恒流泵电源，调节到合适的流速，使“缓冲液”流过检测仪“样品池”，并保证整个系统不出现气泡。此时，按以上(4.3.6.4)调节“T”旋钮，使透光率“T”为“100”，再按纵(4.3.6.5)调节“调零”旋钮，使吸光度“A”为“0”。此时系统达到平衡，可加样检测同时连接收集器，并使收集器处于自动状态，可实现自动检测和样品收集。当样品流过检测仪时，记录仪可根据样品浓度绘出图谱(若要改变给出的图谱出峰大小，可改变“灵敏度”选择档，但检测仪数码管显示不得大于100)。
MC99-3液晶屏能显示“定峰”收集到的有效管号、管数等参数和收集过程的实际波形曲线等。
4.4绘制“T-h”;“A-h”图谱
4.4.1绘制“T-h”图谱(透过峰)：调节“T”旋钮，使记录仪记录笔在满量程位置(即T=100%)，当洗脱样品流过检测仪时，记录仪即可自动绘制出“透过率”T随“时间”h变化的图谱。
4.4.2绘制“A-h”图谱(吸受峰)：按下“T”键，调节“T”旋钮，使透过率为100%，然后按下“0.5A”键，调节“A调零”旋钮使吸光度A为零(即记录仪记录笔在零位)作为基线(为防止系统出现漂移，基线亦可调节在大于零的位置上，如记录仪满量程十分之一的位置上，读取A值时注意扣除此数值)。当洗脱样品流过检测仪时，记录仪即可绘制出吸光度A随时间h变化的图谱。选取吸光度量程视样品浓度和吸受峰大小而定，通常选取“0.5A”档，能满足一般实验需要。
4.5注意事项
4.5.1必须使用标准的三芯电源插座，且接地良好，以确保使用安全
4.5.2在安装连接过程中必须断电关机操作，待安装检查完毕后，再可开机调试，以免损坏机器。
4.5.3安装“层析柱”时，定位后必须旋紧各自的固定螺钉，以免固定不稳后造成“层析柱”的损坏。
4.5.4每次使用前必须对收集器重新定位(如要从内圈向外圈收集时，必须在内圈终点报警时，复位后重新定位，此时的第一管为内圈的第一管。MC99-3会自动定位。)。
4.5.5试管盘与仪器是单独配置的，不能与其它仪器混用。万一配错可通过试管盘上的编号和仪器后面板上的编号重新配置，使编号一致后才能正常使用。
4.5.6硅胶管是易损件，使用一段时间后要及时更换。
4.5.7仪器应避免在强光下工作。在仪器通电情况下不得取出“样品池”和选择滤光波长，以免仪器受损。
4.5.8数字显示的“吸光度”和记录仪自动绘制“吸光度”的图谱是两个互相独立的检测系统。
4.5.9在使用前必对整个系统进行清洗，以保证系统的精度。
4.5.10层析系统平衡后(一般装柱后须平衡数小时)，在开始加样前再校对一次“T”100%和“吸光度”零基线，加样后不可再调节“检测仪”所有旋钮。
4.5.11MC99-3与泵配套使用时，则必须将恒流泵设置在恒速工作状态。
4.5.12MC99-3定滴、定峰收集时，计滴头内孔必须保持清洁不可残留任何杂物及灰尘。
4.5.13MC99-3在正常使用过程中不可将安全阀、警控扦头等拨出，若要扦拨则必须在关闭电源后进行。
4.5.14样品杯、梯度仪二者选一使用;记录仪、电脑采集器二者选一使用。
4.5.15实验结束后，必须马上对系统进行清洗(将“样品池”进口接入恒流泵，用蒸流水清洗十分钟以上)，不然会污染“样品池”和“层析柱”，再次使用时会影响检测数据的准确性，严重的会造成系统不能正常工作，尤其会对检测仪的“样品池”造成永久性的污染，这必须更换“样品池”才能正常工作。清洗结束后关闭电源。
4.5.16本仪器不宜输送有机溶剂和强酸强碱溶剂!
4.5.17厂方对其进行技术改进，恕不事先通知。
5.附件
1.电源线1根12.计滴头(MC99-3用)1只
2.0.5、1A保险丝各2只13.层析柱φ1.0×401支
3.LM17-1A记录仪1台φ1.6×501支
4.安全阀1套φ2.5×601支
5.竖杆1根14.硅胶管(φ3、φ5)各5米
6.漏液保警板1块15.说明书1份
7.备用试管20支16.合格证1份
8.层析柱固定竖杆1根17.装箱单1份
9.层析柱固定夹2副18.保修卡1份
10.梯度混合杯(500ml)1套
11.四氟搅拌磁棒1根
操作步骤：
一、输液泵电源，开机设置合适流速(毫升/分钟)，开启泵单元输入流动相，观察管道内压力，要求小于200公斤压力。如内压过大，要减小流速。
二、检测器电源，开机设置特定波长(nm)和灵敏度(Aufs)预热20分钟，观察检测读数。
三、在线检测
1、打开浙江大学N2000在线色谱工作站，选择通道，填写实验信息，在方法菜单栏上点击采样控制，设置采样时间、文件保存路径、保存方式、文件名。
2、在方法菜单栏点击积分，选择积分参量、积分方法、样品重量、积分最小面积，时间参数等相关参数后点击“采用”按钮。
3、在方法菜单栏点击谱图显示，设置时间显示范围、电压表示范围、谱图显示颜色、数据显示内容，点击“采用”按钮。
4、在方法菜单栏点击仪器信息，输入相关仪器参数。
5、在通道菜单栏点击数据采集，观察流动相基线是否平稳，待基线平稳，在检测器通过“zero”键调零。
(1)标样谱图：用进样针抽取相应量标品，把手动进样器扳钮按逆时针方向旋至“load”处，将进样针插入进样孔，注入标液，注完将进样器扳钮按顺时针方向旋至“inject”处，同时点击外带按钮或数据采集菜单栏“采集数据”按钮。数据采集完毕，自动积分，文件存于相应地址。
(2)样品谱图：在方法菜单栏点击组分表，在对话框点击谱图按钮，调入标样谱图，通过鼠标拖动圈住对应峰，设定相关参数，点击采用按钮，用进样针抽取相应量样品，进样方式同标样。点击采集按钮，采集时间结束，文件存于设定地址。
四、离线工作。打开浙江大学N2000离线色谱工作站，打开相应谱图，通过积分方法、组分表，报告编辑、显示设置及相关菜单栏设定相关参数，最后打印报告。
五、检测工作结束，把流动相换成超纯水进行冲洗进样器及流通管道，观察输液管内压、检测器读数、