恒温恒湿箱相对湿度是绝对湿度与最高湿度之间的比，它的值显示水蒸气的饱和度有多高，它的单位是%。相对湿度为100%的空气是饱和的空气。相对湿度是50%的空气含有达到同温度的空气的饱和点的一半的水蒸气。相对湿度超过100%的空气中的水蒸气一般凝结出来。随着温度的增高空气中可以含的水就越多，也就是说，在同样多的水蒸气的情况下温度升高相对湿度就会降低。因此在提供相对湿度的同时也必须提供温度的数据。通过相对湿度和温度也可以计算出露点。
以下是恒温恒湿箱计算相对湿度的公式：
ρw–绝对湿度，单位是克/立方米
ρw,max–最高湿度，单位是克/立方米
e–蒸汽压，单位是帕斯卡
E–饱和蒸汽压，单位是帕斯卡
s–比湿，单位是克/千克
S–最高比湿，单位是克/千克