LC-MS/MS方法检测动物组织中β-兴奋剂类药物

  仪器网 ·  2011-05-31 22:35  ·  23568 次点击
卫生部近日汇总公布了《食品中可能违法添加的非食用物质和易滥用的食品添加剂品种名单》,上海月旭公司从公布的黑名单中统计发现,包括三聚氰胺、苏丹红、孔雀石绿、人工合成色素等都在内。针对这些令人触目惊心的食品添加剂,同时也为食品安全检查和监管工作提供有力的技术支持和保障,上海月旭公司迅速组织相关人员研制出了方便、快速、准确的检测方法,现将LC-MS/MS检测动物组织中β-兴奋剂类药物的方法公布如下:1.适用范围适用于动物组织中盐酸克伦特罗和莱克多巴胺药物的检测。2.提取将5g动物组织、15mL乙酸乙酯、3mL10%碳酸钠溶液置于50mL离心管中,10000rpm均质2min。6000rpm下离心2min,将上清液转至另一离心管中。用15mL乙酸乙酯重复提取一次,合并提取液。向乙酸乙酯提取液中加入5mL0.1mol/L的盐酸溶液,涡动1min,然后再6000rpm下离心1min,收集下层水相。重复萃取一次,合并下层水相,用2.5mol/LNaOH溶液调节pH至5.2,待净化。3.净化活化/平衡:依次向Welchrom®P-SCX(60mg/3mL)中加入3mL甲醇、3mL水和3mL30mmol/L盐酸溶液,流出液弃去;上样:将上述提取液加入柱中,流出液弃去;淋洗:依次用3mL水、3mL甲醇淋洗,淋洗液弃去,并将小柱抽干;洗脱:用2×2mL5%氨化甲醇洗脱,收集洗脱液,40℃下氮气吹,50%乙腈复溶,过0.22μm滤膜,待分析;4.色谱质谱条件4.1色谱条件色谱柱:UltimateXB-C18液相色谱柱(2.1mm*100mm,3μm)流动相:A:0.1%甲酸水溶液B:乙腈梯度洗脱,程序见右图:流速:0.2mL/min进样量:10μL柱温:35°C运行时间:12min4.2质谱条件扫描模式:MRM离子源:ESI+毛细管电离电压:3.20Kv孔电压(cone):45V电离源温度:100℃脱溶剂温度:300℃锥孔气流速:50L/Hr脱溶剂气流速:450L/Hr名称母离子子离子孔电压(V)碰撞电压(eV)驻留时间(ms)定量离子对定性离子对盐酸克伦特罗277.2167.82028100-+203.02016200+-莱克多巴胺302.17106.81828100-+164.11814200+-盐酸克伦特罗-D9288.2209.22216100+莱克多巴胺-D3305.2167.11814100+5.结果5.1回收率和重现性实验将猪肌肉空白样品经过液液萃取初步处理后,分别添加一定量的标准溶液,添加浓度分别为0.5μg/kg、1μg/kg、5μg/kg、每批次内同一浓度做3次平行实验,共3个批次(样品典型回收率色谱图见附图)。图1猪肌肉中添加0.1mg/kg盐酸克伦特罗EIC谱图图2猪肌肉中添加0.1mg/kg莱克多巴胺EIC谱图本方法中使用到得耗材:1.固相萃取小柱Welchrom®P-SCX60mg/3mL(P/N:WSP020306)2.色谱柱:UltimateXB-18,50*2.1mm,3μm(P/N:Ult3B18205)3.13mm,孔径0.22μm尼龙针孔滤膜(P/N:WEL-SFNY213022)4.12孔固相萃取装置(WEL-Vac-12)

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