发酵罐操作程序
仪器信息网 · 2011-08-17 22:35 · 34032 次点击
一,准备
检查电路、水路、气路(蒸汽、空气)、阀门、仪表是否正常
1,将所有阀门、电控开关打到关停位置;
2,打开蒸汽总阀;
3,打开排冷凝水阀,待冷凝水排完后关闭此阀;
4,打开空气总阀;
5,打开循环水总阀;
6,打开电源总开关,以及仪表电源、控制回路电源、各支路(光照,搅拌)电源开关。
二,空气精过滤器灭菌
消除精过滤器及过滤器到发酵罐之间的所有管路的杂菌,保证精过滤器处于无菌状态,并作好各项操作记录
1,打开蒸汽支阀、空气支阀,按压控复位按扭
2,打开“蒸汽--空气阀”;
3,打开精过滤器下边的排冷凝水阀,待冷凝水排完后,将此阀打到微开状态;
4,将自动补压开关打到手动位置,使补压电磁阀处于开通状态;
5,打开精过滤器后边的补压手动阀;
6,打开进罐气液混合阀上的小阀,打开进料阀上端的小阀,打开“精空气--上料阀”上的小阀,直到各小阀有蒸汽“丝丝”喷出为止,保证有一定量的蒸汽通过精过滤器;
7,调节“蒸汽--空气阀”,使精过滤器上的压力表指示在0.11MP--0.15MP之间,并保持30分钟;
8,计时完毕,迅速打开空气阀并关闭“蒸汽-空气阀”,吹干吹凉,一般二十分钟可达到要求;
9,关闭所有相关小阀门。
三,空消
直接将蒸汽通入发酵罐内,对发酵罐进行灭菌,并对所有电路、管路、仪表及发酵罐进行全面检查,并作好各项操作记录
1,将“灭菌--发酵”开关打到灭菌位置;
2,关闭补压手动阀,半开排气阀;
3,打开夹套下排水阀;
4,打开“蒸汽--精空气阀”;
5,打开“精空气--上料阀”、上气液混合阀,使蒸汽从上路进入发酵罐内;
6,打开下气液混合阀、卸料底阀,使蒸汽从下路进入发酵罐内:
7,当温度达到121度时,打开取样阀、取样灭菌阀,微开过料阀及过料阀小阀门,调节“蒸汽--精空气阀”、上气液混合阀、排气阀以及下气液混合阀、卸料底阀,将温度控制在121-125度之间,压力控制在0.11-0.15MP之间,保持30分钟
8,计时完毕,依次关闭卸料底阀、下气液混合阀、上气液混合阀、取样阀、取样灭菌阀、过料阀、过料小阀、“精空气--上料阀”、“蒸汽--精空气阀”;
9,半开排气阀。
四,加料
将培养基从加料桶泵压到发酵罐
1,将配好的培养基加入加料桶,搅拌均匀,调PH值到规定值;
2,打开排气阀;
3,关闭料桶排水阀,打开入泵阀,出泵阀,闭合上料泵电源;
4,打开进料阀;
5,打开上气料混合阀,使培养基从上路进入发酵罐内;
6,打开“精空气--上料阀”,打开下气液混合阀,以及卸料底阀,使培养基从下路进入发酵罐;
7,当培养基达到规定剂量时,关闭卸料底阀、“精空气--上料阀”、进料阀、上气料混合阀;
8,关闭上料泵入、出阀,关闭上料泵电源。
五,实消
用蒸汽对罐内的培养基全面彻底灭菌,作好各项操作记录
1夹套预热:
A,将“灭菌--发酵”开关打到灭菌位置;
B,打开夹套下排水阀;
C,打开夹套蒸汽阀;
D,半开排气阀;
E,当夹套底部完全发烫时,关小夹套泄水阀,调整夹套蒸汽阀,使夹套压力不高于0.05MP;
F,调整排气阀;
G,当温度达到50度时开搅拌;
F,当发酵罐温度达到100度时,关闭夹套蒸汽阀。
2,发酵罐内通蒸汽:
A,关闭补压手动阀,打开“蒸汽--精空气阀”、“精空气--上料阀”、上气液混合阀,使蒸气从上路进入发酵罐;
B,打开下气液混合阀、卸料底阀,使培蒸气从下路进入发酵罐;
C,关闭种子罐上气液混合阀、补压手动阀,打开种子罐“蒸汽--精空气阀”、下气液混合阀、输料阀、过料阀,使蒸汽从中路进入发酵罐;
D,调整排气阀,使温度与压力同步上升;
E,当温度上升到121度,压力到达0.11MP,调整“蒸汽--精空气阀”、排气阀,使发酵罐内温度保持121--125度之间,压力在0.11--0.15MMP之间,并计时30分钟
F,保温保压30分钟后,依次关闭卸料底阀、下气液混合阀、“精空气--上料阀”、过料阀、种子罐输料阀、“蒸汽--精空气阀”,打开种子罐手动补压阀、上气液混合阀。
六,冷却
尽量快速将灭菌后的培养基冷却到可以接菌的温度,一般在30--35度,并作好各项操作记录
1,关闭夹套下排水阀;
2,打开夹套上排水阀;
3,打开强制冷却阀;
3,将“灭菌--发酵”开关打到发酵位置,将补压开关打到自动位置,打开补压手动阀,关小上气液混合阀
4,当温度降到80度时开搅拌;
6,当温度降到30--35度之间,关闭强制冷却阀,将冷却开关打到自动位置。
七,接菌
将种子罐种液压力输送到发酵罐
1,关闭种子罐上气液混合阀、手动补压阀,打开种子罐“蒸气--精空气阀”、下气液混合阀;
2,打开过料阀的小阀门,至有蒸汽“丝丝”喷出;
3,持续30分钟后,迅速打开种子罐补压手动阀,关闭种籽罐“蒸气--精空气阀”,吹干吹凉过料管,一般为二十分钟左右;
4,将种子罐补压开关打到手动位置,手动控制种子罐手动补压阀或者上气液混合阀,使种子罐压力高于发酵罐压力,种子罐压力最高不超过0.11MP;
5,将发酵罐补压开关打到停的位置,调整排气阀,使两罐获得较大的压差,但发酵罐压力不能低于0.02MP;
6,打开种子罐卸料底阀,关闭种子罐下气液混合阀;
7,待过料阀的小阀门有种液漏出,迅速关闭小阀门,打开过料阀;
8,待种子罐内种液压输完毕后,种子罐压力会迅速下降,此时关闭过料阀,关闭种子罐各阀;
9,将自动补压开关打到自动位置。
八,发酵
为结种后的料液提供适宜的温度,正确的压力,充分的光照,足够的溶氧,每隔半小时,记录一次温度、压力、光照电压、电流,随时检查各阀门与各开关所处的位置是否正确。
1,菌肥:
A,关闭排气阀;
B,打开第一组灯管(1.3.5.7灯管),并将灯管电压调到190伏,二十四小时后,开第二组灯管(2.4.6.8灯管),同样将灯管电压调到190伏,再过二十四小时,将两组灯管电压调至200--210伏,再过二十四小时,将两灯管电压调到220伏
2,饲料添加剂:
A,调整排气阀,使排气流量计指示1.5--2.0立方米之间;
B,用黑布遮住上下视窗;
C,将加热开关打到自动加热位置。
九,取样
发酵过程中,及时了解发酵状况,为化验提供最佳基样,为产品合格提供有力依据
1,打开“蒸汽--精空气阀”;
2,打开取样灭菌阀,开度以有蒸汽“丝丝”喷出为佳,计时30分钟;
3,计时完毕,迅速打开“精空气--上料阀”,关闭“蒸汽--精空气阀”,吹凉取样管;
3,打开取样阀,关闭取样灭菌阀,火焰圈套在三角瓶口,使基样从火焰圈中流入三角瓶,接适量基样后,关闭取样阀。
十,出料
将发酵好的药液无菌送至灌装缓冲罐,保证罐装顺利进行,并记录出罐起止时间
1,清洗出料管过滤器;
2,打开“蒸汽--精空气阀”、下气液混合阀、输料阀、输料三通阀;
3,调整罐装缓冲罐进料阀,使缓冲罐排气阀有大量蒸汽冒出,微开缓冲罐排水阀,将冷凝水排出,并保持30分钟;
4,计时结束,迅速打开“精空气--上料阀”,关闭“蒸汽--精空气阀”、上气液混合阀,吹干吹凉输料管,一般为20分钟;
4,打开卸料底阀,关闭下气料混合阀、“精空气--上料阀”,打开上气液混合阀,
5,有药液进入缓冲罐时,关闭缓冲罐排水阀;
6,若为菌肥,还需将照明电压调到0伏;
7,调整缓冲罐进料阀,使缓冲罐内液体不超出液位玻璃管上下刻线(上刻线离缓冲罐顶部10厘米,下刻线离缓冲罐底部10厘米)。
十一,清洗
出料结束后,将罐内残留药液冲洗干净,以保设备的清洁性
1,将所有电控开关打到关停位置;
2,关闭输料阀,打开排气阀、清洗排水阀;
3,打开视窗,用高压水枪冲洗,或用其他方法,直到罐内各玻璃管、发酵罐壁、各棱角彻底干净为至;
4,关闭清洗排水阀,向发酵罐内注入一定量的冲洗水,打开输料阀,调整罐装缓冲罐的排水阀,直至卸料管,出料管过滤器与罐装缓冲罐清洗干净为止;
5,关闭所有阀门;
6,如继续使用,向发酵罐内加注培养基,若闲置不用,则向罐内注满清水,拧紧玻璃视镜。