色谱
Aaron · 2009-03-02 18:37 · 16925 次点击
色谱法,又称色层法或层析法,是一种物理化学分析方法,它利用不同溶质(样品)与固定相和流动相之间的作用力(分配、吸附、离子交换等)的差别,当两相做相对移动时,各溶质在两相间进行多次平衡,使各溶质达到相互分离。它的英文名称为:chromatography这个词来源于希腊字chroma和graphein,直译成英文时为color和writing两个字;直译成中文为色谱法。但也有人意译为色层法或层析法。
右图为高中生物学实验中的叶绿体色素纸层析分离实验,就是一种简单常见的色谱分析方法(纸色谱)。
1906年由Tswett研究植物色素分离,提出色谱法概念;他在研究植物叶的色素成分时,将植物叶子的萃取物倒入填有碳酸钙的直立玻璃管内,然后加入石油醚使其自由流下,结果色素中各组分互相分离形成各种不同颜色的谱带。按光谱的命名方式,这种方法因此得名为色谱法。以后此法逐渐应用于无色物质的分离,“色谱”二字虽已失去原来的含义,但仍被人们沿用至今。
在色谱法中,静止不动的一相(固体或液体)称为固定相(stationaryphase);运动的一相(一般是气体或液体)称为流动相(mobilephase)。
柱色谱(Columnchromatography)为向玻璃管中填入固定相,以流动相溶剂浸润后在上方倒入待分离的溶液,再滴加流动相,因为待分离物质对固定相的吸附力不同,吸附力大的固着不动或移动缓慢,吸附力小的被流动相溶剂洗下来随流动相向下流动,从而实现分离。
纸色谱(Paperchromatography)以滤纸条为固定相,在纸条上点上待分离的混合溶液的样点,将纸条下端浸入流动相溶剂中悬挂,溶剂因为毛细作用沿滤纸条上升,样点中的溶质从而被分离。(图片就是纸色谱法。)
薄层色谱(Thin-layerchromatography)是在玻璃板上涂以固定相涂层,然后点样,下端浸入溶剂,同样自下而上分离。常用于探索柱色谱实验条件,溶剂和固定相的选择等。
常用固定相有石膏、氧化铝、蔗糖、淀粉等,常用流动相为水、苯等各种有机溶剂。
色谱法的分类方法很多,最粗的分类是根据流动相的状态将色谱法分成四大类。
色谱法按流动相种类的分类:
┌────────┬───────┬───────────────┐
│色谱类型│流动相│主要分析对象│
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│气相色谱法│气体│挥发性有机物│
│液相色谱法│液体│可以溶于水或有机溶剂的各种物质│
│超临界流体色谱法│超临界流体│各种有机化合物│
│电色谱法│缓冲溶液、电场│离子和各种有机化合物│
└────────┴───────┴───────────────┘