752型分光光度计结构原理与使用方法752型分光光度计为紫外光栅分光光度计，测定波长200nm～800nm。
**1.结构原理**
752型分光光度计由光源室、单色器、样品室、光电管暗盒、电子系统及数字显示器等部件组成，仪器的工作原理如图Ⅱ-5-14所示。仪器内部光路系统如图Ⅱ-5-15所示。从钨灯或氢灯发出的连续辐射经滤色片选择聚光镜聚光后投向单色器进狭缝，此狭缝正好位于聚光镜及单色器内准直镜的焦平面上，因此进入单色器的复合光通过平面反射镜反射及准直镜变成平行光射向色散光栅。光栅将入射的复合光通过衍射作用形成按照一定顺序均匀排列的连续单色光谱，此时单色光谱重新返回到准直镜，然后通过聚光原理成像在出射狭缝上。出射狭缝选出指定带宽的单色光通过聚光镜落在试样室被测样品中心，样品吸收后透射的光经光门射向光电管阴极面。根据光电效应原理，会产生一股微弱的光电流。
此光电流经电流放大器放大，送到数字显示器，测出透光率或吸光度，或通过对数放大器实现对数转换，显示出被测样品的浓度C值。
图Ⅱ-5-14752型分光光度计结构原理图
图Ⅱ-5-15752型分光光度计光学系统图1.钨灯;2.滤色片;3.氢灯;4.聚光镜;5.进狭缝;6.保护玻璃;7.反射镜;8.准直镜;9.光栅;10.保护玻璃;11.出狭缝;12.聚光镜;13.样品;14.光门;15.光电管。
**2.使用方法**
752型分光光度计的外部面板如图Ⅱ-5-16所示。
1)将灵敏度旋钮调到“1”档(放大倍数最小)。
2)打开电源开关，钨灯点亮，预热30min即可测定。若需用紫外光则打开“氢灯”开关，再按氢灯触发按钮，氢灯点亮，预热30min后使用。
3)将选择开关置于“T”。
4)打开试样室盖，调节0%旋钮，使数字显示为“0.000”。
5)调节波长旋钮，选择所需测的波长。
6)将装有参比溶液和被测溶液的比色皿放入比色皿架中。
7)盖上样品室盖，使光路通过参比溶液比色皿，调节透光率旋钮，使数字显示为100.0%(T)。如果显示不到100.0%(T)，可适当增加灵敏度的档数。然后将被测溶液置于光路中，数字显示值即为被测溶液的透光率。
8)若不需测透光率，仪器显示100.0%(T)后，将选择开关调至“A”，调节吸光度旋钮，使数字显示为“000.0”。再将被测溶液置于光路后，数字显示值即为溶液的吸光度。
9)若将选择开关调至“C”，将已知标定浓度的溶液置于光路，调节浓度旋钮使数字显示为标定值，再将被测溶液置于光路，则可显示出相应的浓度值。
图Ⅱ-5-16752型分光光度计面板图
1.数字显示器;2.吸光度调零旋钮;3.选择开关;4.浓度旋钮;5.光源室;6.电源室;7.氢灯电源开关;8.氢灯触发按钮;9.波长手轮;10.波长刻度窗;11.试样架拉手;2.100%T旋钮;13.0%T旋钮;14.灵敏度旋钮;15.干燥器。
3.注意事项
1)测定波长在360nm以上时，可用玻璃比色皿;波长在360nm以下时，要用石英比色皿。比色皿外部要用吸水纸吸干，不能用手触摸光面的表面。
2)仪器配套的比色皿不能与其它仪器的比色皿单个调换。如需增补，应经校正后方可使用。
3)开关样品室盖时，应小心操作，防止损坏光门开关。
4)不测量时，应使样品室盖处于开启状态，否则会使光电管疲劳，数字显示不稳定。
5)当光线波长调整幅度较大时，需稍等数分钟才能工作。因光电管受光后，需有一段响应时间。
6)仪器要保持干燥、清洁。