葡聚糖凝胶说明书

  仪器信息网 ·  2010-07-23 23:44  ·  37052 次点击
葡聚糖凝胶的化学稳定性
葡聚糖凝胶不溶于一切溶剂(除非它被化学降解)。它在水、盐溶液、有机溶剂、碱和弱酸性溶液中都是稳定的,在强酸中凝胶骨架的糖苷键被水解。长期接触氧化剂将破坏凝胶,因而应避免使用。
葡聚糖凝胶的物理稳定性
葡聚糖凝胶并不熔融,可以在湿态、中性PH进行灭菌或在高压灭菌器120℃、30分钟而不影响它的色谱性质。干态的凝胶加热至120℃以上将开始焦糖化。葡聚糖凝胶的机械强度取决于交联度。
葡聚糖凝胶的使用方法
1.乙醇浸泡:
在室温下,将干粉浸泡于50-60%乙醇中至少24小时,并不断搅拌以保证凝胶溶胀,用无盐水洗去残存的乙醇滤干;
2.无盐水浸泡:
室温下,在无盐水中充分溶胀24小时,间隙搅拌,以保证凝胶的完全溶胀,然后;
3.盐酸浸泡:
在常温下再用0.2NHCl浸泡12小时,间隙搅拌,滤干,水洗只中性;
4.将溶胀好的凝胶脱气后(真空抽滤或超声波)根据装柱要求一次性置入柱内,注意保持湿态装柱,并避免柱内产生气泡或断层;
5.上样前平衡层析柱至少3-5个柱体积直到记录仪基线变得平稳为止(流出液的PH值等于上柱的Buffer的PH值);
6.凝胶过滤的上样量一般为5%的柱床体积,我们建议初次上样控制在1-2%的床体积,视分离情况可以调整;脱盐时上样量可以达到20%的柱床体积,柱高的选择也与分离要求相关,柱高控制在40-50cm以下,过高的凝胶层会引起较大的反压,应当尽可能避免。难分离物质要有一定柱高和流速控制,脱盐时高径比为5:1即可;
7.在位清洗(CIP)
凝胶使用十次后作一次CIP,目的是去除柱床内沉淀的及顽固残留的蛋白。方法是以40cm/h用1M氢氧化钠反向洗四个柱体积,再以至少三个柱体积平衡缓冲液再生。
8.洗脱方法:
可以用无盐水,也可以采用上柱时的缓冲液洗脱;在上柱Buffer中加入NaCl等梯度洗脱或盐梯度洗脱也可以完全分离纯化;
葡聚糖凝胶的产品说明:
产品名称分离范围应用
葡聚糖凝胶G-10<700缓冲液交换、脱盐,分离小分子,去除小分子
葡聚糖凝胶G-15<1500缓冲液交换、脱盐,分离小分子,去除小分子
葡聚糖凝胶G-251000-5000工业上脱盐及交换缓冲液
葡聚糖凝胶G-501000-30000多肽分离、脱盐、清洗生物提取液、分子量测定
葡聚糖凝胶G-752000-70000蛋白分离纯化、分子量测定、平衡常数测定
葡聚糖凝胶G-1002000-120000蛋白分离纯化、分子量测定、平衡常数测定
葡聚糖凝胶G-1505000-300000蛋白分离纯化、分子量测定、平衡常数测定
葡聚糖凝胶G-2005000-600000蛋白分离纯化、分子量测定、平衡常数测定

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