Agilent1100液相色谱基本操作步骤
Alu · 2011-05-30 21:48 · 31456 次点击
(一)、开机:
1、打开计算机,进入WindowsNT(或Windows2000)画面,并运行BootpServer程序。
2、打开1100LC各模块电源。
3、待各模块自检完成后,双击Instrument1Online图标,化学工作站自动与1100LC通讯,进入的工作站画面如下所示。
4、从“View”菜单中选择“MethodandRuncontrol”画面,单击”View”菜单中的“ShowTopToolbar”,“Showstatustoolbar”,“Systemdiagram”,”Samplingdiagram”,使其命令前有“√”标志,来调用所需的界面。
5、把流动相放入溶剂瓶中。
6、打开Purge阀。
7、单击Pump图标,出现参数设定菜单,单击Setuppump选项,进入泵编辑画面。
8、设Flow:5ml/min,单击OK。
9、单击Pump图标,出现参数设定菜单,单击Pumpcontrol选项,选中On,单击OK,则系统开始Purge,直到管线内(由溶剂瓶到泵入口)无气泡为止,切换通道继续Purge,直到所有要用通道无气泡为止。
10、单击Pump图标,出现参数设定菜单,单击PumpControl选项,选中Off,单击Ok关泵,关闭
Purgevalve。
11、单击Pump图标,出现参数设定菜单,单击Setuppump选项,进入Pump编辑画面,设Flow:1.0ml/min。
12、单击泵下面的瓶图标,如图所示(以二元泵为例),输入溶剂的实际体积和瓶体积。也可输入停泵的体积。单击Ok。
(二)数据采集方法编辑:
1、开始编辑完整方法:
从“Method”菜单中选择“Editentiremethod”项,如上图所示选中除“Dataanalysis”外的三项,单击Ok,进入下一画面。
2、方法信息:
在“MethodComments”中加入方法的信息(如:方法的用途等)。
单击Ok进入下一画面。
3、泵参数设定:(以二元泵为例)
在“Flow”处输入流量,如1ml/min,在“SolventB”处输入70.0,(A=100-B),也可Insert一行”Timetable”,编辑梯度。在“PressureLimitsMax”处输入柱子的最大耐高压,以保护柱子。
单击Ok进入下一画面。
4、自动进样器参数设定:
选择合适的进样方式,如图所示,进样体积1.0ul,洗瓶位置为6号。“StandardInjection”----只能输入进样体积,此方式无洗针功能。“InjectionwithNeedleWash”----可以输入进样体积和洗瓶位置,此方式针从样品瓶抽完样品后,会在洗瓶中洗针。“Useinjectorprogram”---可以点击Edit键进行进样程序编辑。
点击Ok进入下一画面。
5、柱温箱参数设定:
●在”Temperature”下面的方框内输入所需温度,并选中它,点击”more>>”键,如图所示,选中”Sameasleft”---使柱温箱的温度左右一致。
●点击ok进入下一画面。
6、VWD检测器参数设定:
●在”Wavelength”下方的空白处输入所需的检测波长,如254nm,在”Peakwidth(Responsetime)”下方点击下拉式三角框,选择合适的响应时间,如>0.1min(2s)。
●在Timetable中可以“Insert”一行,输入随时间切换的波长,如1min,波长=300nm。点击ok进入下一画面。
7、DAD检测器参数设定:
●检测波长:254nm,BW=30nm,参比波长=350nm,BW=100nm;
●检测波长:一般选择最大吸收处的波长。样品带宽BW:一般选择最大吸收值一半处的整个宽度。参比波长:一般选择在靠近样品信号的无吸收或低吸收区域。参比带宽BW:至少要与样品信号的带宽相等,许多情况下用100nm作为缺省值。Peakwidth(Responsetime):其值尽可能接近要测的窄峰峰宽。Slit—狭缝窄,光谱分辨率高;宽时,噪音低。同时可以输入采集光谱方式,步长,范围,阈值。选中所用的灯。
●点击Ok进入下一画面。
8、RID检测器参数设定:
●色谱条件:
进样体积:20ul。光学单元温度:Off。
极性:正。峰宽(响应时间):4s。
●如图所示:“OpticalUnitTemperature”---若环境温度控制在±2℃,设定为Off,若环境温度不稳定,则设定光学单元温度为高于环境温度5度,以防样品在池中沉淀。“Peakwidth”---大多数分析设为4S,只有在高速分析下设为更短。“Automaticrecyclingafteranalysis”---在不进行分析时可以让流动相循环,节省流动相,检测器连续运行,可随时投入使用。
●*****点击RID图标,选择RIDControl:Heater设为On,若要循环流动相,必须将“RecyclingValve”设为ON。手动purge