安捷伦(Agilent)1100 LC维护保养知识
仪器信息网 · 2011-05-30 21:58 · 19618 次点击
1、色谱柱长时间不用,存放时,柱内应充满溶剂,两端封死(如ACN适于反相色谱柱,正相色谱柱用相应的有机相)
2、对于手动进样器,当使用缓冲溶液时,要用水冲洗进样口,同时搬动进样阀数次,每次数毫升。
3、流动相使用前必须过滤,不要使用多日存放的蒸馏水(易长菌)。
4、带seal-wash的1100,要配制90%水+10%异丙醇,以每分2—3滴的速度
虹吸排出,溶剂不能干涸。
5、其它主意事项见说明书,或由现场工程师介绍。
维护知识问答
1、为什么溶剂和样品要过滤?
溶剂和样品过滤非常重要,它会对色谱柱、仪器起到保护作用,消除由于污染对分析结果的影响。
色谱柱:由于填料颗粒很细,色谱柱内腔很小,溶剂和样品中的细小颗粒会使色谱柱和毛细管容易堵塞。
仪器:溶剂和样品中的细小颗粒会增加进样阀的堵塞和磨损,同时也会增加泵头内的蓝宝石活塞杆和活塞的磨损。
样品过滤头的类型:
30mm内径:适用于大进样量的过滤,由0.2µm和0.45µm两种规格,材料有纤维素,醋酸纤维,聚四氟乙烯。处理样品体积少于50µl。
13mm内径:适用于范围广的过滤,由0.2µm和0.45µm两种规格,材料为纤维素。
3mm内径:适用于小进样量的过滤,由0.2µm和0.45µm两种规格。处理样品体积为7µl。
滤膜类型:
1.聚四氟乙烯滤膜:适用于所有溶剂,酸和盐,并无任何可溶物。
2.醋酸纤维滤膜:不适用于有机溶剂,特别适用于水基溶液,推荐用于蛋白质和其相关样品。
3.尼龙66滤膜:适用于绝大多数有机溶剂和水溶液,可用于强酸,70%乙醇、气相慢1-2个数量级。因此,样品进入色谱柱后,在柱子以外的任何死体积(进样器、柱接头、连接管、检测器)中,样品分子的扩散和滞留,都会引起
色谱峰的展宽,而使柱效降低。为使柱外效应减之最小,获得理想的分析结果,Agilent1100LC使用加工工艺难度高的毛细管线作为流动相管路。
毛细管线分类:0.17mm内径------绿色;0.12mm内径-------红色。
PEEK管线:内径-----0.13mm;0.18mm;0.25mm;0.5mm。
毛细管线优点:柔韧性好.
***Agilent公司同时备有1/16in的粗外径毛细管线,适用于不同习惯的用户,优点是刚性好,但柔韧性差一些。
4、流动相使用前为什么要脱气?
流动相使用前必须进行脱气处理,以除去其中溶解的气体(如O2),以防止在洗脱过程中当流动相由色谱柱流至检测器时,因压力降低而产生气泡。气泡会增加基线的噪音,造成灵敏度下降,甚至无法分析。溶解的氧气还会导致样品中某些组份被氧化,柱中固定相发生降解而改变柱的分离性能。若用FLD,可能会造成荧光猝灭。
常用的脱气方法比较:
氦气脱气法:利用液体中氦气的溶解度比空气低,连续吹氦脱气,效果较好,但成本高。
加热回流法:效果较好,但操作复杂,且有毒性挥发污染。
抽真空脱气法:易抽走有机相。
超声脱气法:流动相放在超声波容器中,用超声波振荡10-15min,此法效果最差。
在线真空脱气法:Agilent1100LC真空脱机利用膜渗透技术,在线脱气,智能控制,无需额外操作,成本低,脱气效果明显优于以上几种方法,并适用于多元溶剂体系。
5、如何防止溶剂瓶内溶剂过滤器的堵塞,以及堵塞后的处理?
溶剂的质量或污染以及藻类的生长会堵塞溶剂过滤器,从而影响泵的运行,尤其水溶液或磷酸盐缓冲液(PH=4—7)。以下几种方法可以有效防止溶剂瓶内溶剂过滤器的堵塞。
A:请严格执行溶剂过滤。
B:请勿使用多日存放的蒸馏水及磷酸盐缓冲液
C:如果应用许可,可在溶剂中加入0.0001---0.001M的叠氮化钠.
D:在溶剂瓶内溶剂的上方小流量连续吹氩气,以隔绝空气。
E:避免使溶剂瓶暴