如何用半自动定氮仪测定蛋白质含量
计量专家 · 2011-12-16 09:00 · 40422 次点击
凯氏定氮法是测定食物中蛋白质含量的经典方法,测定结果不乱,正确。其中半自动定氮仪、蛋白质测定仪都是利用凯氏定氮仪设计的,但是全自动蛋白质测定仪价格昂贵,目前尚难普及。而相应的半自动定氮仪,却得到了相关人士的认可。由于相较于全自动蛋白质测定仪,它的性价比更高,而且其测定结果与尺度法测定无明显差异。定氮仪作为蛋白质含量测定的首推仪器,具有不可撼动的地位。
用半自动定氮仪测定蛋白质含量,其步骤如下:
1.样品消解:正确称取0·5~2·0g混匀固体样品或吸取5·0~10·0ml液体样品于干净的消化管内,加0·5~1·0g硒粉或10g硫酸钾1g硫酸铜,10ml硫酸,摇匀,加10ml过氧化氢,混匀,将消化管放入消化器,放上装好密封圈的排污管,打开抽气三通进水,使抽气三通处于吸汽状态。接通电源,进行消化,如遇难消化的奶粉等样品,可于消化过程中适当增加过氧化氢的加入量,至消化液呈透明蓝绿色液体,封闭电源,冷却,定容至100ml。此过程约需1~2h。
2.测定:打开电源,按仪器仿单调试仪器进入待机状态(约0·5min)。把装有50ml硼酸溶液及2~3滴指示液的三角瓶放到接收托盘上,接收管插入液面,再将内装适量消化样品的消化管放到蒸馏器上,加20ml纯水及消化时硫酸5倍量的氢氧化钠液,打开蒸汽开关进行蒸馏。当流出液至150ml左右时下移接收瓶,使接收管脱离液面,用纯水冲刷接收管,继承蒸馏0·5min,结束。取下消化管,关掉蒸汽开关,仪器还原到待机状态。馏出液用0·0500mol/L的盐酸尺度溶液滴定至淡紫色为终点,计算蛋白质含量。同时做试剂空缺实验。
与粗蛋白测定仪比拟,半自动定氮仪只是较后者少了消化炉,而其测定结果能够知足实验室的需求。因此,半自动定氮仪在良多地方都得到了认可。