应该是柱效不行。当柱子用过一段时间后，柱效会有一定下降。但不会对所有物质都有明显效应。做别很好，是不是所用流动相不一样?也会出现这种现象。你所用的流动相是醋酸溶液-乙睛(3：1)，所要求的柱子的柱效要非常好!柱子最好耐水性强，这样就会分离很好。建议你用一根好的柱子，耐水性强的，进口的柱子试试，估计就可以了。一个可能的原因是不是你样品中药物的浓度太高了，信号溢出了，另外，如果各个浓度都一样，又不想换柱子可以试试加点三乙胺什么的，把你的流动相组分调整一下，当然要查一下资料。当然柱子的柱效也是一方面的原因了。