一、农产品质量安全监测抽样技术
采样是选取有代表性的果蔬样品。应根据样本种类实际情况确定采样方法，通常有随机法、对角线法、五点法、“Z”形法、“S”形法、棋盘式法、交叉法等。应避免采有病、过小或未成熟的样本。取样本时，需在植株各部位(上、下、内、外、向阳和背阴面)采取。擦去表面泥土或洗净后待检测。
1.1采样的总体原则
“一三五”原则：
“一”即一个样品一个袋子，独立包装；
“三”即茄果瓜类等大果型蔬菜至少采不同地方的三个；
“五”即叶菜类蔬菜至少采不同地方五棵。
1.2检测时要从每棵蔬菜上取样
具体的取样
①叶菜类：青菜、小青菜、菜心、菜苋、米苋、生菜、菠菜、蕹菜、大白菜、杭白菜、黄芽菜、空心菜、娃娃菜、鸡毛菜、油麦菜、塔菜、芥兰、草头、紫角叶、荠菜、蓬蒿、黄心菜、甘蓝、卷心菜、牛心菜、菊花菜、芹菜、美芹、水芹、黄心芹、香菜、豆苗、金丝芥、
芥菜、马兰、韭菜、韭黄、大葱、小葱、大蒜、蒜苗、洋葱等
叶菜类取1克样品时，不易太碎，以叶为主。葱蒜等特殊菜注意假阳性，样品比对是用标准对照库。
②花菜类：花菜、白花菜、青花菜等
花菜类选取3棵样品，取叶1克(1厘米长宽，不要剪的太碎)。
③果菜类：茄子、番茄、青茄、红茄、辣椒、尖椒、甜椒、杭椒、青椒、黄瓜、西葫芦、冬瓜、瓠瓜、苦瓜、丝瓜、南瓜、节瓜、金瓜、佛手瓜、豇豆、刀豆、芸豆、扁豆、白扁豆、毛豆、蚕豆、豌豆、荷兰豆等
果菜类可以采取顺皮削取1克的方法。具体用带刮皮器的水果刀顺皮削下一片，然后切成1厘米左右见方碎片。
④食用菌：蘑菇、香菇、平菇、袖珍菇、金针菇、茶树菇等
食用菌类可以采取整株浸泡的方法。
二、GB/T5009.199-2003《蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量快速检测》检测过程的关键控制点。
2.1标准实施的必要性
我国是农药使用的第一大国(年使用量100万吨以上)，由农药残留引起的食物中毒事故屡有发生，这主要分为在蔬菜、瓜果上使用高毒农药后，短时间内采摘和食用所引起的急性中毒事故和农药残留量超过最高允许限量(MRL值)，长期食用引起的慢性中毒两种。由于农药品种结构不合理，加上一些人为不合理的使用，以及农药残留监管力度不够，致使我国农药残留问题比较突出。
农残超标的主要原因：一是生产者不严格按农药安全使用准则的要求进行生产,使用违禁农药或使用量和安全期掌握不好。二是施药器具喷洒的均匀性欠佳,易导致局部给药超量所致。
由于高毒、高残留的有机磷农药如：对硫磷、甲基对硫磷、乐果、氧乐果、敌敌畏及甲胺磷等占据了杀虫剂产量的70％以上，并且其中70％以上的中毒事故都是由有机磷农药引起的。
2.2标准操作的可行性
酶抑制法是研究最多且相对成熟的一种对部分农药进行残留快速检测技术。酶抑制法是利用有机磷与氨基甲酸酯类农药可特异性地抑制昆虫中枢和周围神经系统中乙酰胆碱酯酶(AChE)的活性，破坏神经的正常传导，使昆虫中毒致死这一毒理学原理，将AChE与样品反应，根据AChE活性受到抑制的情况，可判断出样品中是否含有有机磷与氨基甲酸酯类农药。为了提高检测的灵敏度和准确度，将提取液用比色法进行分析，从而研制出各种农药残留快速检测仪。残留农药对乙酰胆碱酯酶活性有抑制，浓度越高，抑制率越高。仪器通过测定酶与底物、显色剂显色反应变色速率，并与空白对照比较求得酶抑制率，从而判定农药残留量是否超标。
2.3标准实施的作用与意义
蔬菜中的水份、碳水化合物、蛋白质、脂等物质不会对农药残留物的检测造成干扰，不必进行分离去杂，节省了大量预处理时间，从而能达到快速检测的目的。因此该方法既具有快速方便、前处理简单、又无需专业仪器(设备相对简单)，适用于现场的定性和半定量测定。
此标准操作简便、易行、成本低、前期投入少，适合生产基地、市场、超市等进行市场准入和产地准出农药残留初筛快速批量检测。通过采用现场快速初筛检测和实验室验证性检测结合，对结果阳性的样品用准确、可靠的色谱法进行验证，可大大减少分析工作量，提高分析效率，有利于加强农药残留监控的力度。
2.4检测过程的关键控制点
①检测过程中温度与提取时间对结果的影响
以大米为样品，通过检测不同温度、不同提取时间，所得到的抑制率来选择，所得结果见图1和图2。从图中可见，样品的提取温度在10-30℃范围抑制率变化较小，高于30℃时抑制率有所降低，而静置制备样品提取时间达6分钟后，抑制率不再增加。
②关键点假阳性的控制
假阳性的产生：一方面，由于各蔬菜品种间(如：葱蒜类、香菜、韭菜等容易出现假阳性的蔬菜)对检测抑制率有不同干扰和影响，使一般的快速检测方法难以区分与农残抑制作用的比例关系容易造成误判(假阳性)；另一方面，因色素的干扰可能影响检测结果的准确性。当待测样品的色素(如：叶绿素、胡萝卜素等)含量较高时，会使测得的透过率非常低，从而造成对吸光度随时间变化值计算的错误，影响检测结果的可靠性。
《果蔬农药残留比对数据库》：2004年，上海博纳新技术研究所与农业部农产品质量监督和检测中心(北京)及中国农业大学农药残留与环境毒理教研室共同合作，依据GB/T5009.199-2003的标准，在CL-BⅢ农残快速测定仪的基础上成功研发了《果蔬农药残留比对数据库》，初步解决了应用“酶抑制率法+分光光度法”检测有机磷和氨基甲酸酯类农药残留时存在的部分“检测盲区”，在一定程度上避免了检测结果的假阳性，并实现了检测过程中对吸收光谱的自动校准。利用这一科研成果，可使非专业人员能较快掌握相应的操作技能，从而达到复杂原理与简易操作的有机统一。
如何处理和避免假阳性？
A．由于果蔬细胞液中存在有抑制胆碱酯酶的物质，在检测取样时，最好不要将果蔬样品切的太碎，以免果蔬细胞液流入检测液中，影响实验结果。
B．大多果蔬由于剪得太碎，或浸提时间过长，使得提取的样品溶液中，含有较多叶绿素，干扰实验结果的准确性。
C．韭菜、生姜、葱、辣椒、胡萝卜等蔬菜中，含有破坏酶活性的物质，处理这类样品时，必要时可采取整株蔬菜浸提。
D．用CL-BⅢ残留农药测定仪的软件中，“保存对照”和“装入对照”的功能，我们能分别建立相应果蔬品种的空白对照库。并能用相应果蔬品种的空白对照同该果蔬品种的样品进行测定。这样就有可能对如：韭菜、生姜、葱、辣椒、胡萝卜等蔬菜进行更好地检测。
现阶段，我国农业上有机磷农药和氨基甲酸酯类农药的种类有一百多种，质量和品种很杂，不宜用气相色谱方法逐一查出。用CL-BⅢ残留农药测定仪，能较好地避免假阳性，把好质量关。
三、上海博纳农药速测仪的使用注意事项和故障排除。
3.1仪器的维护、保养
①存放仪器的地方必须保持干燥、防尘、防振动。
②仪器内部通道应保持干净，无灰尘，若有污物，可用棉质物拭净。
③仪器操作时，必须注意比色皿通光面不能受到手指或油迹等污染，如有污物或液体可用过滤纸檫净。
④仪器所配套的各个检测项目所需的辅助设备、检测试剂和检测用品器具。每次检测完毕后，应注意进行维护和保管。
⑤禁止在仪器DC输入孔插入非本公司配套的其他电源。
⑥仪器使用前必须先仔细阅读仪器使用说明书，根据说明书上的操作步骤进行操作。如仪器出现不正常现象时，应通知销售商或送到特约维修点维修。用户不得自行拆卸修理，否则将影响销售商按照仪器维修条款提供优质服务。
3.2常见问题及解决方法
1．仪器开机，为什么液晶屏不亮？
解决方法：检查电压如果高于220V，则仪器及其稳压电源可能被烧坏，请更换稳压电源；若更换稳压电源后，仍然无法开机，请将仪器寄送回我公司修理。
2．联机操作调0/100时，无红线，软件为何显示“没有检查到指定的设备，请检查仪器连接”？
解决方法：首先检查仪器与电脑间的数据线是否连接好。若连接正常，请检查仪器是否调整为“受控工作模式”，然后在食品质量安全检测软件中的设备设置中，选择相应的仪器型号。如果还是不行，则换一台电脑试试，有可能是电脑的串口出故障。
3．在调0和100后为何会出现“您调0/100有误”，出现800或是更高的红线？
解决方法：确认是否在调0时放入黑块，黑块拿出时调100；另外不要在0到100或是100到0的变化过程中，按下0/100键。
4．调0/100时，按下0键，或100键后，红线为什么不马上变为0或100？
解决方法：这种现象是正常的，要在调0/100按“结束分析”键后，重新点击“开始对照分析”键，才会看到0线和100线的数值变为0或100。
5．调0/100时，数据曲线总是为0或其数值总是在上下飘动，无法稳定，是怎么回事？
解决方法：仪器与电脑的数据采集线是否连接好；正常联接排除后有可能是比色池中的灯泡老化，需要更换灯泡。
6．在使用移液枪时要注意哪些问题？
A．在加入不同的试剂时，一定要用不同的枪头。
B．在取出试剂后，要检查枪头内的试剂有无气泡。
C．在向试管内加入试剂时，要保证枪头与液面垂直,并将试剂全部加入溶液中，而没有在留在试管壁上。
7．为什么在第一检测仪中做完对照后，在第二检测仪中做不出样品测试，总是让重做对照测试？
解决方法：检查其它通道中是否装入对照样例，点击“”，选择相应通道，点击“读取”。
8．为什么做空白对照时红线的起始值很低？
解决方法：在做标准溶液配置时，加完底物后晃动试管并将溶液倒入比色皿后快速放入比色池，不要过很长时间后再放。检查比色皿是否由于清洁而影响其透光率，更换新的比色皿或者把不干净的比色皿放到酒精中浸泡4-5小时，然后用棉球将其擦拭干净。
9．怎样的对照才是正常的对照？
解决方法：一般看对照的差值，检测的时间为3分钟，则差值应该大于8，如果差值偏小达不到要求，则表明试剂中有一样或几样过期，无法使用。
10．如果试剂过期，如何判断是什么试剂过期？
此问题分几种情况
A．当对照结束后，对照溶液的颜色没有什么变化，则表明有可能是酶试剂过期。
B．当加入底物后，对照溶液一下子变为深黄色，则表明有可能是底物过期。
C．如果换过一瓶新酶，依然出现A中的现象，则有可能是显色剂过期。
11．为什么要使用标样库及如何正确使用。
每种蔬菜都有自己特殊的一种化合物，该化合物对酶的作用和农药对酶的作用是类似的，即：会抑制酶的活性。有些蔬菜本身对酶的活性的抑制作用比较强，而有些则较弱。在所有的蔬菜中有刺激性气味的蔬菜对酶活性的抑制作用是比较强的，为来更好的消除这种来自蔬菜本身的影响，上海博纳新技术研究所和中国农大合作开发来该标准对照库，也是全国唯一一家有此对照库的厂家。
A．做一标准的空白对照，并且进行保存。
B．按“装入对照样例”键，打开对照数据库，在选择“标准对照库”。
C．在对照上半部分选择当天做的空白对照。
D．在对照库下半部分选择所做蔬菜的修正对照。
E．在对照库的右上角出选择所要用的通道，并在通道号前打“√”。
F．在对照库的右下角处按“读取”键完成转入工作。
12．为什么做样品分析时会出现“采样点透过率太小”？
解决方法：检查是否在做样品分析的时，加入底物后时间过的较长才进行样品分析。是否样品本身的沉淀物和杂质含量较多，样品本身的色素干扰作用，是否品种为假阳性——用滤纸或其他方式进行过滤，在“系统设置”菜单中选种“自动修正色素干扰的检测结果”，选择样品比对库。
13．样品检测值为何总是偏大？
此问题有数种可能，请分别检查下面的步骤是否正确：
A．没有做空白对照，或用来以前的空白对照。
B．在做样品溶液时，菜叶剪得太碎，以至于检测液颜色较深。建议菜叶大小为1厘米见方。
C．检测液中有悬浮物或浑浊物，使光线无法正常通过比色皿，建议过滤后再检测。
D．试剂加入的顺序错误，或漏加某个试剂。试剂加入的顺序一定是：酶，显色剂，底物。
E．比色皿污浊或放入方位错误，使光线无法通过比色皿。
F．比色皿外表有水滴使样品曲线不正常。
14．样品检测值为何总是偏小。
此问题有数个可能，请分别检查下面的步骤是否正确：
A．没有调0和100。
B．制作样品检测液时，静止等待的时间不够15分钟。
C．加入酶和显色剂后等待的时间不够15分钟。
15．为什么在做完样品测试后，电脑没有直接跳出检测结果？
解决方法：“系统设置”菜单中不要选种的“检测完成后自动保存检测结果”，如选种，检测结果就需要在“统计汇总”菜单下的“自动保存检测数据”一栏查看。
16．为什么在数据保存时会出现“无法修复与压缩数据”？
解决方法：由于数据库文件出现损坏，需要重新安装软件。平时在做数据的过程中尽量多进行备份，以免数据丢失。
17．为什么会出现“本机时间快于服务器时间”，从而导致数据无法上传？
解决方法：把电脑的时间调整到服务器时间之后，重新进行上传。