膜过滤(微孔滤膜)在检验领域的应用(1)

  仪器信息网 ·  2012-04-18 18:37  ·  34290 次点击
在临床检验中的应用
国内医疗单位,在生化检验中使用不同孔径的微孔滤膜分离蛋白质,可以选择性地截留血清或体液中各种不同分子量大小的蛋白质。该方法简便、经济、用量少,是临床检验和科研工作中一种方便的分离蛋白质方法;在微生物检验中能提高结核菌及痢疾杆菌的检出率;在免疫学检验中利用硝酸纤维素膜-ELISA法可以检测HBcAg,方法是将待测血清中乙肝病毒颗粒先与抗HBc作用,形成较大的免疫复合物颗粒,经过滤浓集于NC膜上,然后在3mol/LNaCNS作用下裂解,暴露出HBcAg,与HRP-抗HBc反应后显色,在此微孔滤膜起浓缩作用。
微生物限度检查
在检测75%乙醇溶液的微生物限度时,取一定量的75%乙醇溶液用孔径0.45μm薄膜过滤,再用无菌生理盐水反复冲洗,在无菌状态下移至营养琼脂平板,同时以无菌生理盐水滤膜作阴性对照,在30℃条件下培养,观测结果。在检测含抑菌成分的药品微生物限度(细菌、霉菌酵母菌数)时,使用滤膜过滤法与洗脱法比较,结果洗脱法不能正确反映被检品染菌量,平均回收率仅为13%,而滤膜过滤法能定量反映被检品的染菌量,平均回收率达97%,且操作方便、步骤少。该法采用了陶瓦盖,所得菌落饱满、凸现,便于观察、计数和分类定性。
在检测使用中消毒剂的微生物污染状况时,使用滤膜过滤法可去除抑菌物质,较真实的反映实际情况。在检测液体食品和饮料中细菌总数和大肠菌群数、酵母菌、霉菌时,采用滤膜过滤的方法,灵敏性、准确性较高,检出率高,可以代替平皿倾注法、多管发酵法。用滤膜过滤法在细菌培养过程中其代谢产物和拮抗物质不易横向扩散,有利于菌落的独立生长,避免菌落的迁延现象,排除了优势菌群的干扰,菌落易于分辨,提高了实验的准确性

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