脉动真空压力蒸气灭菌柜其灭菌原理是通过真空泵借助水的流动抽出灭菌柜室内冷空气，使其处于负压状态，然后输入饱和热蒸气，使其迅速穿透到物品内部，如此反复3次或4次。在高温和高压力的作用下使微生物蛋白质变性凝固而灭活达到灭菌要求。灭菌后，抽真空使灭菌物品迅速干燥。工作流程采用电脑控制，具有方便、省时、省力、总灭菌时间短、灭菌彻底可靠、物品干燥等特点。是目前医院医用物品消毒灭菌不可缺少的仪器之一。
1、真空泵持续工作负压不下降的原因
真空泵持续抽吸负压不下降的原因：
①真空泵本身的原因，如真空泵动能下降，真空泵反转等;
②总水压过低，水压力4min，其原因：
①蒸气源总压力低0.4MPa/cm2，并预热灭菌柜内物品，充分排除冷凝水及蒸气中的多余水分等，夹层压力达0.1MPa/cm2时再关闭夹层排水阀，等夹层压力达0.2MPa/cm2时再启动进入消毒灭菌程序。合理调整减压阀使蒸气按所需压力进入灭菌柜，防止产生超热现象。压力表安全阀，应每年校正1次，发现问题随时更换，疏水阀应保持通畅，提高蒸气质量，为保证输入的系洁净合格的饱和蒸气(即水雾≦10%，空气≦5%)，输入管道宜单独设置，距离不宜太长，管道系统应有保温材料包裹，并附设过滤器以除去蒸气中的杂质、污物，设水汽分离器以排队蒸汽中的冷凝水雾。物品包装大小适宜，纵向排列，器械包放下层，敷料包放上层，包与包之间留一定间隙以利蒸气穿透。
3、B-D试验失败
脉动真空蒸气灭菌柜每日灭菌前或检修后均应进行B-D试验，以检测灭菌柜空气排除效果，如不合格，说明冷空气排除不彻底或柜室内有渗漏现象，不能用延长启动时间来纠正。
B-D试验失败原因：
①灭菌柜本身的因素，真空泵动能下降，灭菌器使用时间长，灭菌柜老化，致使柜室内未达到应有的真空程度。自控系统失灵，抽负压时间缩短，不利于冷空气的释放与排除。柜室密封性能下降，不能维持规定的负压，造成排除冷空气的同时仍有冷空气的渗入，如门密封条老化，自锁皮碗有裂纹。
②技术操作因素，试验包规格大小不适宜，布类不符合要求，包扎过紧，影响蒸气穿透。温度升高过快，4min生物监测合格，但化学指示卡颜色不符合灭菌要求，即灭菌失败，使灭菌监测失去意义，或过期、潮湿。灭菌化学指示卡在包内与金属器械或玻璃类直接接触，由于金属和玻璃没有吸水性，灭菌时产生的冷凝水容易积聚，浸湿包内指示卡，使指示卡接触水分过量，变色发生异常。即使灭菌成功也会失去监测意义。
对策：用合格的化学指示卡，适用范围正确。将指示卡放置于灭菌包的中心。化学指示卡应避免酸碱性环境，防潮避光存放。在金属类和玻璃类灭菌包内放置化学指示卡，应避免与其直接接触，应采用隔水防护措施。
医院医疗服务质量与灭菌物品的灭菌效果有直接关系，而灭菌效果与灭菌设备、物品准备各环节及负责灭菌工作人员的工作态度、技术水平等有交。高压蒸气灭菌各环节的管理是保证医疗质量、降低医院感染的关键。在日常工作中，除保证高压蒸气灭菌各环节还要保证灭菌前物品准备过程中各环节的质量及灭菌效果监测，这也是保证灭菌效果的关键所在。