核酸蛋白检测仪*简介
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核酸蛋白检测仪系列产品是液相色谱中具有紫外吸收物质(蛋白、核酸、多肽、酶)的一种紫外检测装置，可直接读出光密度A值，且波长准确度和重复性高、单色性好、定性、定量分析中能直接记录各个峰面积的相对峰面值，并能计算质量相对的含量;仪器配上层析柱，恒流泵，部分收集器等，即组成一套完整的液相色谱分离分析装置，可满足凝胶渗透层析、亲和层析、离子交换层析等多种色谱分析的使用要求，具有极高的性能价格比;广泛应用于现代生物学研究、药物测定、农业科研、化工、食品、大专院校及医疗单位对具有紫外吸收的样品做定性、定量分析。它具有微量样品池进行连续检测，最后达到分离生物大分子。
核酸蛋白检测仪*别名
高性能紫外检测仪全新双光束设计)、智能核酸蛋白检测仪、智能紫外检测仪、自动核酸蛋白分离层析仪、核酸蛋白检测仪、高性能双光束紫外检测仪、高性能双光束紫外检测仪、PLC-2全波长紫外检测仪(双光束)、核酸/蛋白专用分光光度计、双光束紫外检测仪、核酸/蛋白分析仪、高性能紫外检测仪、智能紫外检测仪、智能核酸蛋白检测仪、智能核酸蛋白检测分离层析仪、Eppendorf核酸蛋白测定仪
核酸蛋白检测仪*工作原理
所有紫外吸收检测器工作原理都是基于光的吸收定律---朗伯-比耳定律。光源经220nm、254nm、280nm、340nm等干涉滤色片提供单色光作为检测核酸、蛋白、酶、多肽的光源。具体工作原理正如该定律指出，当一束单色光(λ)辐射通过稀浓度物质溶液时，如果溶剂不吸收光，则液体的吸光度与吸光物质的浓度和光经过溶液的距离成正比。其关系式为：
A(λ)=a(λ)bc
A=-LgT=Lg1/T
核酸蛋白检测仪*主要特点
核酸蛋白检测仪是根据生命科学的发展对于现代色谱仪器的要求而改进设计的一种新型紫外检测仪。以对蛋白、核酸、肽等生物大分子物质的检测、分离和纯化为目的，新型层析实验系统中的电脑核酸蛋白检测系统具有以下特点：
1、系统智能调整吸光度到0.000，透光率到100%。，并在测量范围内的吸光度和透过率严格符合A=Lg(1/T)。
2、单波长检测或双波长同步检测。
3、系统自带数据采集工作站，检测、采集、软件工作站一体化系统集成。分析软件具有实时描谱、分析参数、图谱保存、图谱打印、图谱编辑等功能，提供峰高、峰宽、峰面积、归一化、保留时间、半峰宽、峰底宽、面积含量、纯度、层析柱分辩率等参数。
4、该仪器除了配有10mV记录仪输出信号外，还同时配有适合于计算机积分仪的输出接口(HD-21C-B型)，这样很方便于构成色谱工作站系统。(可同时进行计算机和记录仪信号输出，亦可省去记录仪)
5、该仪器的数字显示设计为固定光吸收A显示和可变量程光吸收A显示两种可选模式，这样可方便于规范化读数(特别是可应用于药品生产的GMP工艺规范化管理)，同时亦可根据科研需要进行可变量程的高灵敏度读数，这样可方便于对低浓度样品检测(HD-21C-B)。
6、该仪器采用新型进口R212光电倍增管和改进型电路结构，仪器全部采用数字显示2个OD值表，用户可直接读出光密度A值，从而使仪器灵敏度高、峰值重复性好、漂移低、性能稳定、质量可靠、使用方便等优点。
7、HD-3000型电脑核酸蛋白检测仪的数字显示设计为固定光吸收，A显示计算机用和可变量程光吸收A显示记录仪用两种可选模式，这样可方便于规范化读数，同时亦可根据科研需要进行可变量程的高灵敏度读数，这样可方便于对低浓度样品检测。
8、在柱层析分离分析过程中，洗脱液流过该仪器样品池，电脑或记录仪即可自动绘制出样品分离的图谱(吸受峰或透过峰)，同时可检测出所需样品在部分收集器试管中的分布情况，并随时监测柱层析过程，特别是在摸索实验过程中，及时改变洗脱条件，以便迅速取得最佳实验方案。
核酸蛋白检测仪*产品优点
1.样品体积小：0.5-2.5ul的样品就可以完成检测;
2.检测耗时短：仅需要5秒钟;
3.检测波长范围宽：200-850nm;
4.检测浓度范围宽：1ng/ul-5000ng/ul(dsDNA)，无需浓缩或稀释样品就可以检测;
5.操作简单：无需比色杯，减少了反复清洗比色杯带来的麻烦，减少了实验误差;
6.检测方便快捷：不需要预热，开机就可使用;
7.数据处理简便：操作界面便捷，数据可轻松转存到Excel中。
核酸蛋白检测仪*产品用途
1.核酸浓度检测：在200-850nm处，检测dsDNA、ssDNA、RNA等核酸浓度;
2.探针检测：检测荧光标记探针的吸光度值，可用于去除未能标记探针的样品;
3.蛋白浓度检测：检测普通纯化后蛋白质的浓度;
4.蛋白标记检测：可检测被BCA、Bradford或Lowry精确定量待测蛋白浓度.
5.糖类、醛类等生物大分子检测：常规紫外光波下检测样品吸光值;
6.细胞培养物检测：检测细胞培养物在600nm处的Abs;
7.未知样品全波长扫描。
核酸蛋白检测仪*技术性能
1.分辨率：1nm
2.核酸蛋白检测仪波长范围：254nm、280nm﹙214nm﹚
3.量程灵敏度范围：0-100℅T、0-2A、0-1A、0-0.5A、0-0.2A、0-0.1A、0-0.05A、0-0.02A、0-0.01A.
4.检测下限：1ng/ul检测上限：5000ng/ul
5.吸光率精确度：0.002Abs(1mm光程)吸光率准确性：±1%(at0.76at257nm)
6.吸光率范围：0.01-100Abs
7.记录仪输出：10mV
8.积分仪输出：0.1A/mV
9.流式样品池：容积100微升、光程5毫米
(微量样品池：容积80微升、光程3毫米)
10.数显模式：固定A量程读数(0-2.0A)：可变A量程读数(0-2.0A、0-1.0A、0-0.5A、0-0.2A、0-0.1A、0-0.05A、0-0.02A、HD-21C-B型)
11.显示方式：主机LED数字显示2个OD值表。
12.滤色器：由254nm、280nm等干涉滤色片组成;(6)最大流量：10ML/min(特殊需要可另配)
13.配接记录仪信号：0-10MV
14.量程在0.05A档时：噪音≦0.002A
15.工作环境温度：-5～35℃。
16.基线噪音：2×10-4;LED数字显示;仪器可连续工作1个月
17.仪器工作时不受到任何震动，周围不受磁场干扰。
18.电源：220VAC±10%50HZ⑿.主机重量：5kg
核酸蛋白检测仪*结构
核酸蛋白检测仪是单光路结构，由紫外检测器、电源和记录仪三部分组成，由紫外检测器和电源连结，属单体结构，现将其构造分别说明如下：
⑴、紫外检测仪：
它由一组光源，四块干涉滤色片，一块聚光透镜，一只样品池，一只光电倍增管，一块放大板和一块
对数板等组成。面板上有聚乙烯塑料管的进样口和出样口，A调零以及调节“光量”大小旋钮(光量大下以箭头表示)。还有光源指示灯、电源指示灯以及量程转换旋钮。
光源主要提供214nm、220nm、254nm、280nm、340nm分别作为检测核酸、蛋白、酶、多肽等的光源。
滤色器由214nm、220nm、254nm、280nm、340nm，四块干涉滤色片组成。从光源发出的光束除214nm、220nm、254nm、280nm、340nm谱线外尚含有其他波长的谱线，通过各自所对应的滤色片就把非主谱线波长以外的其他波长滤去，这就保证了仪器的单色性。
核酸蛋白检测仪除测214nm、254nm、280nm外，其他性能均同紫外检测仪。
样品池由石英玻璃管拉制而成，内径一般为3毫米左右，容积不大于100微升。
光电倍增管采用IP28或R212(进口)光电倍增管作为电转换器，具有灵敏度高，稳定性好的优点。紧靠在光电倍增管后的放大器是一高输入阻抗噪音的直流放大器，它把光电倍增管输出的光电流进一步放大，然后输入到对数转换器。
⑵、电源
本仪器的电源部分是一个独立系统，单独安装在一机箱内。机箱内有两块电路板，一块是输出±12V和+27V的低压稳压电源板，另一块是带有高压负反馈的高压稳压电源板，它由一组输出-700V高压，作为光电倍增管和光源的供电电源，光源工作电压为160V左右，电源面板上装有电源开关、电源指示灯。在电源后面板上，装有电源插头座、保险丝座、记录仪信号插头座以及稳压电源插座。
从光源发出的光经聚光透镜，狭缝，滤色器聚焦到样品池上，此单色光通过样品池射到光电倍增管的光阴极面上，使光束由于样品浓度不同所引起透光强度的变化转换成光电流变化，此光电流经放大器放大，并输入到对数转换器、使透光率T转换成光吸收A输出即A=lg—=ε·CL式中ε为待测样品的摩尔消光系统，C为样品浓度，采用摩尔/升单位，L为光程，用厘米作单位。根据上式只要测出了A、L和ε就可求出样品浓度C。若从放大器直接输入到记录仪，则在记录仪上绘出的是样品透光率T变化的图谱，若从对数转换器输入到记录仪上、在记录仪上绘出的是样品光吸收变化的图谱。
（3）、记录仪
根据用户签订合同而定，目前我公司配备有XWT-1044S型台式记录仪、3057-11型日本进口记录仪。使用时仔细参阅随机说明书。
配我公司仪器记录仪有以下几个要求：1.量程一定用10mV。
2.走纸速度为每小时3cm、6cm或12cm(可自选)
核酸蛋白检测仪*操作步骤
⑴、在仪器使用前，首先连接好所需配套仪器：层析柱、恒流泵、自动部分收集器、记录仪(色谱工作站)。将各类插头与插座接妥(220V电源)。
⑵、按下检测仪ON电源开关，电源指示灯亮，说明整台仪器电源开始工作，然后观察光源指示灯，如果亮了，表示光源已开始工作，整台仪器可进入工作状态，将检测仪波长旋钮旋到所需波长刻度上，把量程旋钮拨到100%T档(仪器预热20分钟，待基线平直后可加样测试)。
⑶、接通记录仪电源开关，使电源开关拨到“通”指示灯亮。可根据记录仪说明书调换不同的纸速度，用户根据需要自行掌握，测量用10mV档。此时记录仪指针从零点开始向右移动某一刻度，调节检测仪“光量”旋钮使指针停留在记录仪大约中间位置5mV左右数字显示为50左右。。
⑷、把检测仪进样口聚乙烯塑料管接到恒流泵上，使凝胶层析柱中缓冲液流过检测仪(恒流泵流量视凝胶层析柱大小选1-3ml/min)。用“调零”调整吸光度A值为0(量程开关拨到100%T调节光量旋钮，使记录仪指针在10mV数字显示为100，即透光率为100%。把量程开关拨到“0.05A”档，缓慢调节A调零旋钮，使记录仪指示在“O”位，检测仪显示为“O”)。
⑸、以上步骤结束，析系统平衡后即可用洗脱液开始洗脱样品，洗脱前再调一次吸光度0点。洗脱过程结束前不可再调节“调零”旋钮。当洗脱液流过检测仪时，吸光度显示大于零的数值，吸光度数值大小随样品的浓度而变化。洗脱完毕后吸光度显示为稍大于零的数值。
⑹、数字显示吸光度和记录仪自动绘制吸光度图谱是两个互相独立的检测系统，数字显示吸光度与记录仪所绘峰值大小没有直接关系，不可互相换算。
⑺、测试完毕后，必须切断电源，并用蒸馏水清洗样品池和聚乙烯塑料管。
注1：记录仪光吸收A读数
当采用10mV量程记录仪时，记录仪的满量程读数对应于A量程开关所对应的A读数范围。如A量程开关选定在0—0.5A时，则记录仪满量程光吸收A读数为0.5，当记录笔指示在记录纸一半(50%刻度)位置时即为0.25A。
注2：数字显示光吸收A读数(可变量程读数模式)
当A量程开关选定在0—1.0A档时，此时数显板上显示和读数即为光吸收A的实际读数，如显示为080即表示为0.80A。
当A量程开关切换在其他量程位置时，则数显光吸收A读数为：
①、A量程选定在0—2.0档时，数显读数×2=实际光吸收读数A
②、A量程选定在0—1.0档时，数显读数×1=实际光吸收读数A(即直接读数)
③、A量程选定在0—0.5档时，数显读数×1/2=实际光吸收读数A
④、A量程选定在0—0.2档时，数显读数×1/5=实际光吸收读数A
⑤、A量程选定在0—0.1档时，数显读数×1/10=实际光吸收读数A
⑥、A量程选定在0—0.05档时，数显读数×1/20=实际光吸收读数A
⑦、A量程选定在0—0.02档时，数显读数×1/50=实际光吸收读数A
注3：当显示模式开关选定固定量程读数时，数字显示板上的读数为实际光吸收A读数，该读数将不随A量程开关的切换而改变。(此时切换A量程开关，只改变记录仪输出的灵敏度，而不影响读数和积分仪信号输出，该功能指HD-21C-B型)
注4：HD-21C-B型紫外检测仪可同时进行记录仪和积分仪信号输出。积分信号输出为0.1A/mV,测定灵敏度可由计算机软件设定。
核酸蛋白检测仪*使用说明
一、直接观察数显窗口检测柱层析分离分析过程
1)置电源开关在“ON”位置，仪器预热30分钟。
2)选定所需波长(254mm或280mm)的干涉滤光片。从有机玻璃盒中取出干涉滤波片，插入仪器背后“滤光片”下面小长方孔内，并使其插入到底部位置。插入时应注意使干涉滤光片侧面有一直径为3mm的半球形凹槽朝上。随(机安装的是280nm滤光片)
3)选定检测样品吸光度或透过率
a.透过率：按下按键开关“T”键，“透过率T”指示灯亮。调节“调T”旋钮，顺时针调节透过率增大。观察数值变化至“100”(此时透过率T为100%)。当洗脱样品流过检测仪(样品池下端为进口)时数显窗口将直接显示样品的透过率T。
b.吸光度：按下按键开关“T”键，调节“调T”旋钮，使透过率T为100%，然后按下“2A～0.05A”任何一键，“吸光度A”指示灯亮，吸光度A应为零，如果显示不为零，可调节“A调零”旋钮。当洗脱样品流过检测仪时数显窗口将直接显示样品的吸光度A。
2.与记录仪配套绘制样品分离图谱。
1)选择系统最佳工作状态
a.记录仪“记录纸速度”选择(2～6)cm/h档。
b.记录仪输入“量程”选择10mv档。
c.恒流泵流速视层析柱大小选择(1～10)mL/min。
2)连接检测仪与记录仪：用随机配套的输出线连接检测仪背后“接记录仪”的插口(此插口输出信号可同时输出给部分收集器作为控制信号)与记录仪输入插座。输出线“黑”“红”两个接线叉分别接在记录仪“L”“H”两个输、、出插座上。
3)绘制“T—h”图谱(透过峰)：调节“调T”旋钮，使记录仪记录笔在满量程位置(即T=100%),当洗脱样品流过检测仪时，记录仪即可自动绘制出透过率T随时间h变化的图谱。
4)绘制“A—h”图谱(吸收峰)：按下“A调零”旋钮，使吸光度A为零作为基线。当洗脱样品流过检测仪时，记录仪即可绘制出吸光度A随时间h变化的图谱。
5)按键开关2A至0.05A每一档均表示记录仪满量程读数。选取吸光度量程视样品浓度和吸收峰大小而定，通常选取“1A”档，此档既便于读数，也能满足一般实验需要。
注意事项：
1.开机前先检查滤光片是否安装到位，严禁在没有安装滤光片的情况下开机!!!以免损坏仪器。
2.层析系统平衡后(一般装柱后须平衡数小时)，即开始加样前再校对一次100%T或吸光度基线，加样后不可再调节仪器所有旋钮。
3.实验结束后，在样品池进口串入恒流泵，用蒸馏水清洗10分钟以上，直到检测仪显示：“T”大于100%，“A”小于0。这样不会因样品池有污垢而影响仪器检测灵敏度和精度。
4.实验结束后取出干涉滤光片置于有机玻璃盒中，并保持盒中干燥，防止接触有害气体，禁止用水或有机溶剂擦拭滤光片表面。
5.仪器应避免在强光下工作。在仪器通电情况下不得取出样品池，以免仪器内光电器件受损。
6.环境温度过低，仪器背面“光源”灯不亮时，按“光源辅助启动”即可。
7.“A显示选择”键，按下时吸光度数值随量程改变而改变;放开时吸光度数值不随量程改变而改变。此键为辅助键，一般情况下不使用。
二、核酸浓度测定(包括dsDNA、ssDNA、RNA、Oligo)
1.例如待测定样品为dsDNA(eg：PCR产物)，按下键“7/dsDNA”(若待测样品为ssDNA，eg：反转录合成的第一链cDNA产物，则相应按下键“8/ssDNA”;若待测样品为RNA，则按下键“9/RNA”;若待测样品为Oligo(寡聚核苷酸)，eg：PCR引物，则相应按下键“6/Oligo”。)
2.将空白对照置入样品孔。注意：空白对照是空白液，并非所有情况都是水。(例如用Tris溶液溶解DNA制品，则要用Tris液做空白对照。)
3.按下键“Blank”;
4.仪器记录空白对照，设置为0.000A;
5.将第一个样品置入样品孔;
6.按下“Sample”;
7.仪器显示第一个样品的吸光度值和浓度值，以及其他相关参考比值;
8.直接放入第二个样品;
9.按下“Sample”;
10.仪器显示第二个样品的吸光度值和浓度值，以及其他相关参考比值;
11.依次测定，每个样品的测定值将自动存储在机器中，查看测定结果的方法如下：
(1)按下键“./Function”
(2)选择“DISPLAY-RESULT”,按Enter键，查看每个样品的测定值记录(本机可存储100个样品的测定值)。设定样品的稀释度：a按下键“Dilution”;b输入样品体积和稀释液体积，按Enter键确认。
三、蛋白质浓度的直接测定(280nm测定)
1.按下键“4/Protein”;
2.将空白对照置入样品孔;
3.按下键“Blank”;
4.仪器记录空白对照，设置为0.000A;
5.将第一个样品置入样品孔;
6.按下“Sample”;
7.仪器显示第一个样品的吸光度值和浓度值，以及其他相关参考比值;
8.依次测定，每个样品的测定值将自动存储在机器中，可查看测定结果。
四、蛋白质浓度显色法的间接测定(Bradford，Lowry，BCA)
1.按下键“1/Bradbord”or“2/Lowry”or“BCA”选择蛋白质显色反应的方法;注：Bradford键按两次，每次显示不同的测定范围。
2.设置标准曲线的标准样品数量、测定次数和浓度范围。按下键“Parameter”用上下键进行选择和参数调整。
3.将空白对照置入样品孔;
4.按下键“Blank”;
5.仪器记录空白对照，设置为0.000A;
6.将第一个标准品或样品(如需沿用已存储的标准曲线，可直接测样品)置入样品孔;
7.按下“Sample”或“Standard”;
8.依次测定标准品或样品，每个样品的测定值将自动存储在机器中，查看测定结果。
五、OD600细菌生长密度测定
1.按下键“5/OD600”;
2.将空白对照置入样品孔;
3.按下键“Blank”;
4.仪器记录空白对照，设置为0.000A;
5.将第一个样品置入样品孔;
6.按下“Sample”;
7.仪器显示第一个样品的吸光度值和浓度值;
8.依次测定，每个样品的测定值将自动存储在机器中，查看测定结果。
注意事项：
1为了尽量减少颗粒对测试结果的影响，要求核酸吸光值至少大于0.1A，吸光值最好在0.1-1.5A。在此范围内颗粒的干扰相对较小，结果稳定。样品的浓度不能过低或者过高。
2混合要充分，否则吸光值太低，甚至出现负值;
3混合液中不能有气泡，空白液无悬浮物，否则读数漂移剧烈;
4必须使用相同的比色杯测试空白液和样品，否则测定浓度结果差异太大;
5换算系数和样品浓度单位选择要一致;
6不能采用窗口磨损的比色杯;
7样品的体积必须达到比色杯要求的最小体积(50ul);
8通常浓度的样品可以用10mm光程长度进行检测。对于高浓度的样品，只需将比色皿旋转90°，使用稍短的2mm光径进行检测。重要的比值表示样品的纯度：1A260/A280，用于评估样品的纯度。纯净的样品，比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA)。如果比值低于1.8或者2.0，表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。2A230表示样品中存在一些污染物，如碳水化合物、多肽、苯酚等，较纯净的核酸A260/A230的比值大于2.0。3A320检测溶液的混浊度和其他干扰因子，纯样品A320一般是0。
核酸蛋白检测仪*应用
核酸蛋白检测仪在很多领域都有应用：
⑴在科学实验工作中检测，许多主要物质如蛋白质、核苷酸等。
⑵在药物生产和研究中，可用来检查激素生物碱，维生素等各种能;产生荧光药品质量，特别适宜作薄层分析和纸层分析斑点和检测。
⑶在染料涂料橡胶、石油等化学行业中，测定各种荧光材料，荧光指示剂及添加剂，鉴别不同种类的原油和橡胶制品。
⑷纺织化学纤维中可测定不同种类的原材料。如羊毛，真丝人造纤维，棉花，合成纤维，并可检查成品质量。
⑸在粮油，蔬菜，食品部门，可用于检查毒素(如黄曲霉素等)，食品添加剂，变质的蔬菜、水果、可可豆、巧克力、脂肪、蜂蜜、糖蛋等的质量。