本方法的原理和检测操作与上述6.5.1中的方法十分相近，其中，样品的提取和测定、结果的计算和表示完全一样;不同之处仅在于样品的层析分离，本方法不采用滤纸，而采用酷酸纤维素薄层。
层析分离过程如下:
(1)醋酸纤维素薄层板的制作和活化。以每块薄层板(200x200mm2)平均需用4g酷酸纤维素和14mL无水乙醇的比例调成糊状，例至清洁玻瑞板上，手工制板，先在室温下风干，再于80℃干操箱中活化30min。然后，放在干燥器内冷却备用。
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(2)点样。取活化处理过的薄层板，将三边各刮去5mm。在距离底边2cm处，以1.5cm间隔，用毛细管将样品液全部(或一部分，视浓度而定)在薄层板上作条状点样，斑点长乘宽不大于15x3mm2。用0.05mL苯洗管壁，用洗液再点样。如此反复，直至洗液无荧光为止。同时，以同样方法，用微量注射器量取10uL的B(a)P标准溶液0.1ug点样，作为标准对照点。另外一个点不点样品，作为展开剂空白点。
(3)层析。点样后薄层板放入薄层层析仪(如图6-11)或层析缸中，加人展开剂。待展开剂前沿上升至15cm处，取出薄层板，放在通风橱中，让展开剂自然挥发、晾千。然后在暗室内，于紫外线灯下观察薄层板上荧光斑点。’用针划出B(a)P标准斑点和其相对应位置的样品斑点及空白点。
(4)洗脱。用光亮无锈的小刀仔细刮下标准斑点、样品斑点和空白点。通过漏斗分别移入lOmL比色管中，再加入5mL苯，并放入一个玻瑞熔封铁芯转子。将比色管放在盛水的烧杯中，于电热磁力搅拌器上加热6590,10min，进行洗脱。然后在离心机上，以3000r/min离心2min。上层清液分别转移于lOmL比色管中。再加5mL苯重复洗脱一次，合并洗脱液至lOmL标线，混匀，作为被侧样品，记下样品溶液体积。本方法具有灵敏度高、重现性好、分离时间比纸层析法较短等优点，近年来成为一种广泛使用的侧定B(a)P的方法。
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