前言
通常检验科是采用干燥管或促凝管留取生化检验用血液标本，这样从抽血到标本凝固再离心分离血清需要有个等待的过程。为加快检验报告的发布时间，提高工作效率，越来越的多实验室开始改用肝素抗凝管留取标本。我们在用血浆标本代替血清标本进行检验时发现亚铁嗪法测定血浆标本存在明显偏高的现象，对此进行实验探讨。
1材料与方法
1.1检测原理
在酸性介质中，与转铁蛋白结合的三价铁Fe3+被盐酸羟胺还原成二价铁Fe2+，生成的Fe2+与亚铁嗪反应形成红色复合物。在一定范围内红色复合物的吸光度与Fe2+的浓度成正比。
1.2标本、试剂和仪器
同时留取门诊就诊患者促凝管血清标本与肝素锂抗凝血浆标本各20份。铁离子检测试剂盒采用宁波美康公司产品，血清校准品采用英国RANDOX公司产品。OLYMPUSAU2700全自动生化分析仪，按试剂说明书设置仪器参数。
2结果
2.1血清基质定标液定标后测定结果用RANDOX公司血清基质标准品校准仪器后，同时测定20份配对的血清血浆标本(见表1)。从表1可见血浆标本的测定结果均比血清标本
[attach]50451[/attach]
高，平均升高（70.1±19.7）μg/dL。以血浆结果为X轴，血清结果为Y轴，做图并做线性回归分析，结果相关系数r=0.920（见图1）；做配对资料t检验，结果P0.05，差异无统计学意义(见表4)，两者相关性良好(见图4)。
[attach]50454[/attach]
[attach]50455[/attach]
3讨论
目前，在用血浆代替血清进行临床生化项目检测的比对研究中，皆未涉及到铁的测定。血清与血浆的最主要区别在于血清不含纤维蛋白原，而血浆含纤维蛋白原。纤维蛋白原的等电点为5.2～5.6，而亚铁嗪法R1试剂的主要成分为醋酸钠缓冲液和羟胺还原剂，pH为5.0，R2试剂的主要成分为亚铁嗪，pH为接近中性的6.88。曾有用盐析比浊法测定血浆中纤维蛋白原的报道，从本文试验和理论分析的结果表明，引起血浆铁测定值假性增高的原因是血浆中的纤维蛋白原在pH为5.0的R1介质中变性盐析所致。
在实验过程中，曾试图加入非离子型表面活性剂以防止纤维蛋白原的析出，但效果并不理想。由于使用的是商品化试剂，因此无法改变R1的缓冲体系。换成其他不同成分不同pH的R1缓冲体系结果是否理想，介于实验条件的限制而不得而知。通常临床生化的定标液都是基于血清基质，用转移定值的方法定值血浆铁的含量，用于血浆铁的测定，结果可基本消除血浆中纤维蛋白的干扰，其原理是血浆定标品中也含有纤维蛋白原，定标时可扣除因纤维蛋白原析出而产生的浊度。当然，这只是一种较为粗略的消除干扰的方法。因为，不同的血浆标本中其纤维蛋白原的含量还是有差别的。所以，寻找一种不会导致纤维蛋白原析出的显色体系乃是解决血浆铁测定问题的最好办法。
本实验的结果也提示我们，在用血浆代替血清进行临床检验研究的时候，最好先用试管法进行预实验以确定反应体系的pH值、离子强度等对纤维蛋白原稳定性是否存在影响。因为，在自动化检测仪器中是无法观察到纤维蛋白原是否沉淀析出的。
来源：《现代仪器》，转载请注明出处-仪器信息网(www.cncal.com）