莱阳梨止咳颗粒原为《中华人民共和国卫生部药品标准》中药成方制剂第十四册(WS3-B-2762-97)收载的品种，处方由莱阳梨清膏、麻黄提取液、杏仁水、北沙参流浸膏、百合流浸膏、远志流浸膏、桔梗流浸膏等组成;具有镇咳祛痰之功效。对于治疗伤风感冒引起的咳嗽多痰，急、慢性气管炎有较好的疗效。由于原质量标准中仅有麻黄的TLC鉴别，为提高产品质量，增强对该品种质量的可控性，本文采用高效液相色谱法对组方中君药麻黄的主要疗效成分盐酸麻黄碱的含量测定进行研究，结果该方法操作简便、准确。
1仪器与试剂
高效液相色谱仪LC-10ATVP(日本岛津公司);二极管阵列检测器(日本岛津公司);岛津chromato-solutionlight色谱工作站;岛津VP-ODSC18(150mm×4.6mm5um);UV-2450型紫外可见分光光度计(日本岛津公司);METELLERAE240电子天平(瑞士)。
乙腈为色谱纯;水为超纯水;其余试剂均为分析纯。盐酸麻黄碱对照品(由中国药品生物制品检定所提供，批号：0714-9903);莱阳梨止咳颗粒(山东莱阳永康制药有限公司);硅胶G板(青岛海洋化工厂)。
2方法与结果
2.1色谱条件
色谱柱：岛津VP-ODSC18(150mm×4.6mm5μm);流动相：乙腈-0.1%磷酸溶液(含0.1%三乙胺)(5∶95);检测波长：205nm;流速：1mL/min，柱温为室温;进样量20μL。理论板数按盐酸麻黄碱峰计应不低于3000。
2.2对照品溶液的制备
取盐酸麻黄碱对照品适量，精密称定，加0.1mol/L的盐酸溶液制成每1mL含52μg的溶液。
2.3供试品溶液的制备
取本品约8g，研细，精密称定，加水40mL使之溶解，置分液漏斗中，加浓氨试液5mL，用乙醚振摇提取5次(分别为40mL，40mL，40mL，30mL，30mL)，合并乙醚液，加盐酸乙醇溶液(1→20)10mL，混匀，低温回收溶剂至干，残渣加乙醇5mL和0.1mol/L盐酸溶液适量使溶解，转移至25mL量瓶中，加0.1mol/L盐酸溶液稀释至刻度。
2.4阴性对照溶液的制备
按处方组成比例，取除麻黄外制成空白样品，按供试品溶液制备方法制备阴性对照溶液，在上述色谱条件下测定，记录色谱图，在与盐酸麻黄碱峰保留时间相同处，无色谱峰出现，表明阴性无干扰(见图1)。
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2.5检测波长的选择
取上述对照品溶液，用紫外可见分光光度计在波长190～500nm范围内扫描，结果盐酸麻黄碱在205nm波长处有最大吸收。因此确定含量测定波长为205nm。
2.6线性关系考察
精密称取对照品16.88mg，置50mL量瓶中，加0.1mol/L的盐酸溶液，充分溶解并稀释至刻度。分别精密吸取0.5mL，1.0mL，1.5mL，2.0mL，2.5mL，3.0mL至25mL量瓶中，加0.1mol/L的盐酸溶液稀释至刻度，摇匀;分别吸取20μL注入高效液相色谱仪中，记录色谱图，测定各峰面积。以峰面积积分值为纵坐标(Y)，进样量为横坐标(X)，求得回归方程Y=22432X+14096，r=0.9997。说明盐酸麻黄碱在6.752～40.512μg范围内，进样量与盐酸麻黄碱峰面积积分值呈良好的线性关系。
2.7精密度实验
精密吸取同一对照品溶液(0.052mg/mL)20μL，连续进样5次，测定峰面积，结果RSD为1.0%，表明仪器精密度良好。
2.8重复性试验
称取同一批号(071002)本品5份，各4.0g，精密称定，按“2.3”项下制备供试品溶液，每个样品进样20μL，测定峰面积，依法测定盐酸麻黄碱含量，结果平均含量为0.059mg/g，RSD为1.1%，说明本方法重复性良好。
2.9稳定性试验
取样品，按供试品制备方法制备样品，分别于0h，2h，4h，8h，12h测定峰面积，结果RSD为1.3%，实验结果表明本品在12h内稳定性良好。
2.10回收率试验
采取加样回收法。取一定量已知盐酸麻黄碱含量的样品6份(批号071002)，研细，精密称定，分别加一定量的盐酸麻黄碱对照品溶液，依供试品溶液制备方法制备供试液，在上述色谱条件下测定含量，平均回收率为97.6%，RSD为0.78%(n=6)(见表1)。结果表明本方法回收率良好。
2.11样品测定
取3批样品，按供试品溶液制备方法制得供试品溶液，按前述色谱条件测定，外标法以峰面积计
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算样品中盐酸麻黄碱的含量(见表2)。
3讨论
3.1色谱条件的选择
曾比较以不同比例的甲醇-水及不同比例的乙腈-0.1%磷酸溶液等为流动相进行试验，均不能得到很好的峰形，并且以甲醇溶解样品及对照品，均有干扰峰存在，干扰检测效果，故选择乙腈-0.1%磷酸溶液(含0.1%三乙胺)(5∶95)为本实验用流动相，且流动相选用乙腈-0.1%磷酸溶液(5∶95)出峰时间短，分离效果较好。
3.2莱阳梨止咳颗粒的定量分析未见报道。由于麻黄为方中君药，主要化学成分为麻黄生物碱类等，为进一步提高本产品质量控制水平，选择麻黄中的有效成分盐酸麻黄碱进行含量测定，试验结果表明，建立高效液相色谱法测定本品中盐酸麻黄碱的含量具有分离效果好、重复性好、专属性强、准确等优点，可作为莱阳梨止咳颗粒含量测定的有效方法。
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