盐酸舍曲林是一类选择性5-羟色胺再回收抑制剂，能帮助提高机体的能力，有效地减轻病人的抑郁症状，包括烦躁情绪，并能减轻持续性的疲劳症状以及焦虑状态。在国际上已广泛用以治疗抑郁性及强迫性精神障碍。本文采用反相高效液相色谱法测定片剂中的盐酸舍曲林及有关物质的含量，操作简便，结果准确可靠。
1仪器与试剂
岛津LC-6A高效液相色谱仪，SPD-6A紫外检测器，waters717自动进样器;盐酸舍曲林片(规格50mg/片;001031、001101、001102三批，天津药物研究院提供);盐酸舍曲林标准品(含量99.87%);甲醇为色谱纯;水为纯化水;三乙胺、磷酸等均为分析纯。
2方法和结果
2.1色谱条件
色谱柱：DiamonsilC18(4.6mm×200mm，5μm);流动相：甲醇-0.2%三乙胺溶液(用磷酸调到pH4.0)=60∶40，流速1.5mL/min;检测波长225nm;进样量20μL。色谱柱理论板数按盐酸舍曲林峰计算应不低于2000，主峰与相邻杂质峰的分离度应符合要求。
2.2溶液的制备
2.2.1标准品溶液精密称取盐酸舍曲林标准品25.0mg，置50mL容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，作为标准品溶液(1)，该标准对照品的盐酸舍曲林浓度为0.5mg/mL。取1.5mL标准品溶液(1)，置100mL容量瓶中，加流动相稀释至刻度，作为标准品溶液(2)，该标准品的盐酸舍曲林浓度为7.5μg/mL。
2.2.2样品溶液的制备取本品20片，研细，精密称取细粉样品(约相当于盐酸舍曲林25mg)，置50mL量瓶中，加流动相使盐酸舍曲林溶解，并稀释至刻度，摇匀，滤过，作为样品溶液，该样品的盐酸舍曲林浓度为0.5mg/mL。
2.2.3空白溶液按处方配制不含盐酸舍曲林的混合辅料，称取混合辅料60mg，置50mL容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，作为空白溶液。
2.3测定方法
2.3.1含量测定取样品溶液20μL注入液相色谱仪，记录色谱图;另取盐酸舍曲林标准品溶液(1)20μL，同法测定，按外标法以峰面积定量(见图1,2)。
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2.3.2有关物质测定取样品溶液1.5mL，置100mL容量瓶中，加流动相稀释至刻度，作为1.5%自身对照溶液。取该溶液20μL，注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高为记录仪满量程的20%~30%，取样品溶液与1.5%自身对照溶液各20μL，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主峰保留时间的2倍，样品溶液色谱图中如有杂质峰，各杂质峰面积之和不得大于1.5%自身对照溶液主峰面积的1.5%。有关物质测定的样品和自身对照溶液图谱（见图2，3）。
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2.4方法专属性考查
2.4.1辅料的影响取空白溶液，在上述色谱条件下，进样20μL，记录色谱图。空白溶液色谱图中在盐酸舍曲林相应保留时间处无色谱峰出现，表明该制剂中其他辅料对测定无干扰(见图4)。
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2.4.2破坏性试验将盐酸舍曲林原料和辅料分别经强光照射，0.1mol/L盐酸溶液及0.1mol/L氢氧化钠溶液破坏后，按上述色谱条件进样测定，结果盐酸舍曲林的各降解产物均与主峰有效分离(见图5~7)，混合辅料对盐酸舍曲林峰测定无干扰。
2.4.3分离度在上述色谱条件下记录的样品溶
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液色谱图中所出现的杂质峰，均与主峰达到良好分离，分离度均大于1.5。
2.5线性关系试验
2.5.1有关物质测定取盐酸舍曲林标准品溶液(2)，分别进样5μL、10μL、20μL、30μL、40μL，记录色谱图。结果表明，进样量在0.037~0.299μg范围内，与峰面积线性关系良好。回归方程为：A=1189224C–3688，相关系数为0.9999。
2.5.2相关性试验取盐酸舍曲林标准品溶液(1)，分别进样5μL、10μL、20μL、30μL、40μL，记录色谱图。结果表明，进样量在2.49~19.94μg范围内，与峰面积线性关系良好。回归方程为：
A=1057291C–155719，相关系数为0.9998。
2.6精密度试验
取盐酸舍曲林样品溶液20μL注人液相色谱仪，连续进样6次，主峰积分面积的RSD为1.97%。
2.7回收率试验
按处方配制不含盐酸舍曲林的混合辅料，称取混合辅料约60mg共9份，分置50mL容量瓶中，再分别精密称取盐酸舍曲林标准品20mg、25mg、30mg置50mL容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，制成浓度为标示量的80%、100%和120%的供试溶液各3份，摇匀，滤过，分别精密量取20μL，注入液相色谱仪，记录色谱图。另取标准品(1)溶液，同法测定。结果平均回收率为99.55%，RSD为0.60%(n=9)。
2.8样品溶液稳定性试验
取样品溶液，于室温下放置，分别在放置0h、1h、4h、10h、12h测定。结果RSD为1.01%。表明12h内样品溶液稳定。
2.9最低检测限
取盐酸舍曲林样品溶液，采用逐步稀释法测得最低检出限为0.15μg/mL。
2.10样品及有关物质测定
按本实验所述方法，测定3批样品(批号001031、001101、001102)和有关物质含量(见表1)。
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3讨论
3.1流动相的选择
用盐酸舍曲林粗品进行流动相的选择和优化。采用C18柱作为分离柱，考察甲醇–20mmol磷酸二氢钠溶液，甲醇–乙腈–醋酸铵溶液，甲醇–三乙胺溶液等流动相系统，试验结果表明，选用甲醇–三乙胺溶液流动相系统为好。为使杂质峰和盐酸舍曲林峰分开，调整水–甲醇的比例，流动相的pH值，三乙胺的加入量，对流动相进一步优化。最后确定甲醇-0.2%三乙胺溶液(用磷酸调到pH4.0)=60∶40为流动相。
3.2检测波长的确定
盐酸舍曲林的紫外光谱中，在波长282nm、274nm、266nm及225nm处有最大吸收。取盐酸舍曲林粗品溶液，分别在210nm、225nm、274nm进行有关物质检查(见表2)，结果表明，在225nm可检出杂质，杂质含量为0.61%，故确定检测波长为225nm。
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4结论
本实验表明，所采用的色谱条件和测定方法，其分析结果及方法专属性良好，可用于盐酸舍曲林片的质量控制。
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