免疫组化脱片的解决
仪器网 · 2012-07-16 13:40 · 39760 次点击
可以从以下几个方面考虑,最重要的还是标本处理
1.标本处理的好坏,一般试验标本我们采取下列处理方法(一般固定24小时,取材,流水冲洗二小时,梯度酒精脱水(70%,85%,95%I,95%II各24小时,无水乙醇I、II各2小时,二甲苯I透明1~1.5小时,二甲苯透明1小时,浸蜡过夜,再包埋。),免疫组化作出来效果很好。
2.多聚赖氨酸处理液要用塑料器皿装,玻片浸泡时间一般要至少5分钟,浸好后要在烤箱中烤干(我们用60度),再取出冷却收好。但贮存时间不能超过半年,否则也影响其防脱片的效果。
3.切片后烘烤时间及温度也很重要,一般捞片后要马上放入60度烘烤至少48小时,如果时间太短或捞片后未及时烘烤,都可能导致脱片。
4.微波修复时间也很关键,很多说明书提倡修复10分钟,其实可间断修复二个5min,若连续修过长时间也易脱片。时间还可更短,2个3分钟等,这要看你的抗体。另外可考虑用大平皿修复,这样水平放玻片可减少重力的影响。