倒置荧光显微镜的构成及工作原理
仪器网 · 2012-07-16 13:40 · 36977 次点击
倒置荧光显微镜是近代发展起来的新式荧光显微镜,特点是激发光从物镜向下落射到标本表面,即用同一物镜作为照明聚光器和收集荧光的物镜。光路中需加上一个双色束分离器,它与光铀呈45。角,激发光被反射到物镜中,并聚集在样品上,样品所产生的荧光以及由物镜透镜表面、盖玻片表面反射的激发光同时进入物镜,反回到双色束分离器,使激发光和荧光分开,残余激发光再被阻断滤片吸收。如换用不同的激发滤片/双色束分离器/阻断滤片的组合插块,可满足不同荧光反应产物的需要。此种荧光显微镜的优点是视野照明均匀,成像清晰,放大倍数愈大荧光愈强。
倒置荧光显微镜由荧光附件与倒置显微镜有机结合构成的,主要用于细胞等活体组织的荧光、相差观察。倒置显微镜(Invertedmicroscope)是为了适应生物学、医学等领域中的组织培养、细胞离体培养、浮游生物、环境保护、食品检验等显微观察。由于这些活体被检物体均放置在培养皿(或培养瓶)中,这样就要求倒置显微镜的物镜和聚光镜的工作距离很长,能直接对培养皿中的被检物体进行显微观察和研究。因此,物镜、聚光镜和光源的位置都颠倒过来,故称为"倒置显微镜"。倒置显微镜多用于无色透明的活体观察,在倒置显微镜的基础上添加一套荧光附件:激光激发块,荧光光源,荧光照明器,激发块切换装置,即可进行倒置荧光观察。
进口四大品牌显微镜都有相应的倒置荧光显微镜,如奥林巴斯的IX71倒置荧光显微镜,CKX41倒置荧光显微镜。国产品牌显微镜厂家近年随着相差技术与荧光成像技术的不断提升,也推出多款倒置荧光显微镜,MSHOTMF51就是一款,其荧光亮度高,且成像清晰,接近国外同类中档显微镜的水准