Waters 2695 型高效液相色谱仪操作方法
仪器网 · 2012-07-20 00:20 · 48570 次点击
1仪器组成及开机
1.1仪器组成本仪器由Waters2695分离单元、2996型二极管阵列检测器、2420蒸发光散射检测器、色谱管理工作站和打印机组成。
2695分离单元包括四元梯度洗脱的溶剂输送系统,四通道在线真空脱气机(或氦气脱气机),可容纳120个样品瓶的自动进样系统,柱温箱,内置的柱塞杆密封垫清洗系统,溶剂瓶托盘,液晶显示器,键盘用户界面及软盘驱动器。
1.2开机依次接通2695分离单元、检测器、计算机和打印机的电源。接通2695分离单元后,约20s仪器开始自检,约1min后,显示主屏幕,此时继续各部件的初始化,待主屏幕上方标题区出现“Idle”时,仪器进入待命状态。
2溶剂管理系统的准备
2.1流动相脱气确认所有溶剂管路都充满溶剂,按【Menu/Status】,进入“Status(1)”屏幕,光标选“Degasser”,按【Enter】,显示选项屏幕,光标下移选“Continuous”,按【Enter】。
2.2启动溶剂管理系统
2.2.1干启动当溶剂的管路是干的或是需要更换溶剂时,在“Status(1)”屏幕下,按【DirectFunction】,光标选“DryPrime”,按【Enter】,显示“DryPrime”屏幕,按欲启动的溶剂管路的屏幕键,如【OpenA】,光标选“Duration”,按数字键输入5min,按【Continue】,待限定时间结束后,重复操作,使实验所需的各溶剂管路均启动、排气并充满流动相。
2.2.2湿启动在“Status(1)”屏幕下,光标选“Compomtion”中欲使用的流动相,输入100%,按【DirectFunction】,光标选“WetPrime”,按【Enter】,显示“WetPrime”屏幕,输入7.5Ml/min和6min,按【OK】,待限定时间结束后,对每种流动相重复操作。
2.2.3平衡真空脱气机在“Status(1)”屏幕下,光标选“Composition”,输入流动相的组成,按【Enter】再用光标选“Degasser”中的“Normal”,按【Enter】,按【DirectFunction】,光标选“WetPrime”,输入0.000mL/min和10min.,按【OK】。待限定时间结束后,按【AbortPrime】。
3样品管理系统的准备
3.1冲洗自动进样器在“Status(1)”屏幕下,光标选“Composition”,输入流动相的组成。按【DirectFunction】,光标选“PurgeInjector”,按【Enter】,显示“PurgeInjector”屏幕,输入“SampleLoopVolumes6.0”,光标下移“CompressionCheck”,按任意数字键,按【OK】。
3.2冲洗进样针在主屏幕下,按【Diag】,显示“Diagnositcs”屏幕,按【PrimeNdlWash】,显示“PrimeNeedleWash”屏幕,按【Start】,30s内应见溶剂从废液排放口流出。按【Close】、【Exit】。
3.3冲洗柱塞杆密封垫在主屏幕下,按【Diag】,显示“Diagnosities”屏幕,按PrimeSealWash,显示“PrimeSealWash”屏幕,按【Start】,待排放口有水流出,按【Halt】、【Close】、【Exit】。
3.4装入样品与转盘将样品瓶插到样品盘合适的位置,打开样品仓门,显示“DoorisOpen”屏幕,装入样品盘,按【Next】,直至所有样品盘装毕,关仓门。
4编辑分析方法及执行样品分析表
在主屏幕下,按【DevelopMethods】,显示“Methods”屏幕。
4.1编辑分析方法
4.1.1建立新的分离方法在“Method”屏幕下,按【New】、【SeparationMethods】,输入方法名,按【Enter】,显示分离方法屏幕,该屏幕共有6页,通过按【Next】或【Prev】切换。如需设定梯度,在第(1)页按【Gradient】,输入后按【Exit】;如需设定色谱柱的温度,在第(4)页输入后按【Exit】;在第(6)页设定检测器的种类,光标选“AbsorbanceDetector”,按【Enter】,光标选“486﹨2487”,按Abs(1)图标,设定检测波长,按【OK】、【Exit】、【Save】。
4.1.2编辑已建立的分离方法在“Methods”屏幕下,光标选欲编辑﹨修改的分离方法的图标,按【Edit】,编辑\改各种分析参数,按【Exit】、【Save】。
4.2编辑执行样品分析表
4.2.1建立新的样品组在“Methods”屏幕下,按【New】、【SampleSet】,输入样品组名,按【Enter】,显示方法组屏幕,在样品组表中输入待分析样品的信息。在“Vial”中输入样品放置的位置;在“Function”中光标选择“Sandard”或“Sample”;在“Method”中选择已建立的方法;在“inj”中输入进样的次数;在“μL”中输入进样的体积;在“min”中输入运行时间。按【Exit】、【Save】。
4.2.2编辑已建立的样品组在“Methods”屏幕下,光标选欲编辑﹨修改的方法组的图标,按【Edit】,编辑﹨修改待分析样品的信息,按【Exit】、【Save】。
5运行样品
5.1在“Status(1)”屏幕下,光标选“Method”,按【Enter】,选已建立的分离方法;光标选“Flow”,输入流速,光标选“Composition”,输入流动相的组成。
5.2在主屏幕下,按【RunSamples】,光标选已建立的样品组,按【Run】、【Satrt】。
6报告打印
在主屏幕下,按【Config】,显示“Configuration”屏幕,按【Reports】,在“ReportOptions”对话框中选择欲输出到打印机或软盘的信息,按【OK】、【Exit】。
7关机
7.1使用完毕,按规定用适当的溶剂冲洗色谱柱、系统管路、自动进样器、进样针和柱塞杆密封垫,确保2695分离单元已彻底冲洗干净后,关闭电源开关。
7.2数据采集完毕后,关闭检测器电源开关。
7.3处理数据并打印报告后,关闭计算机和打印机电源开关,并做使用登记。
附注:
(1)2695分离单元除用上述的系统控制模式外,还可设置非交互模式和色谱工作
站控制模式,详见仪器使用说明书。
(2)色谱管理工作站
①配置安装了数据处理软件的计算机。
②数据处理如果使用Waters的Millennium色谱管理工作站控制2695分离单元分析测定样品,当工作站采集数据时,2695分离单元屏幕上方的标题区出现“Remote”。色谱管理工作站的基本操作步骤为:设置一个含有2695分离单元的色谱系统,建立一个含有2695分离单元的仪器方法,用已获得的仪器方法建立一个方法组,用已建立的方法组运行样品,处理并打印出色谱运行所得到的数据