材料与方法
1材料
1.1仪器
Agilent1100Series高效液相色谱仪，紫外检测器，HPHPLC(3D)化学工作站(美国安捷伦)。A/D电子分析天平(1/10万，日本)。超声波清洗器(JN-5200DT，宁波江南仪器厂)。紫外可见分光光度计(UV-2100,美国Labtech)。
1.2试剂
齐墩果酸标准品(中国药品生物制品鉴定所提供，批号110709-200505)，川木通对照药材(中国药品生物制品鉴定所提供，批号121409-200401)，川木通药材(分别购自北京，安国，张家口)，关木通药材(购自吉林)。
甲醇为色谱纯，所用水为去离子水，其他试剂均为分析纯。
2方法
2.1实验部分
2.1.1色谱条件
Agilent1100Series高效液相色谱仪，HypersilBDSC18(4.6mm×200mm，5μm)色谱柱，紫外检测器。流动相：甲醇-水(0.5%冰醋酸，0.2%三乙胺)。流速：1.0mL/min。柱温：35℃。进样量：20μL。检测波长215nm。
2.1.2对照品溶液的制备
称取齐墩果酸对照品10.1mg，甲醇溶解，定容至10.00mL，得1.01mg·mL-1的齐墩果酸对照品溶液，备用。
2.1.3样品溶液的制备
川木通药材粉碎过40目药筛，取药材粉末5g，精密称定，置于250mL具塞锥型瓶中，加50mL甲醇浸泡12h，超声提取35min，抽滤，残渣再同法提取两次，抽滤，合并滤液，酸水解3h，减压浓缩甲醇定容至5.00mL，进样前用0.45μm滤膜滤过，即得。
2.1.4线性关系考察
精密吸取齐墩果酸对照品溶液，按1:2，1:4，1:8，1:16，1:32，1:64，1:128倍比稀释，加上原液，按2.1.1项下色谱条件依法进样，测定峰面积。以峰面积为纵坐标，齐墩果酸的浓度为横坐标绘制标准曲线，得回归方程。
2.1.5含量测定
精密称定川木通药材，按2.1.3项下制备样品溶液，以2.1.1项下色谱条件测定，记录色谱图，用回归方程求出药材中齐墩果酸的含量。
2.1.6比较试验
将川木通对照药材，四批川木通药材及关木通药材按样品溶液制备方法制备供试品溶液，分别进行紫外检测，比较紫外吸收图谱。
2.2方法学考察
2.2.1色谱系统适用性
在2.1.1项下色谱条件检测齐墩果酸对照品及川木通药材，记录色谱图。
2.2.2精密度实验
用齐墩果酸对照品溶液重复进样5次，每次进样量为20μL。记录色谱图，计算齐墩果酸的峰面积RSD值。
2.2.3重复性实验
取购自四川的同一种川木通药材粉末3份，分别按2.1.3项下方法制备样品液并进样测定。记录色谱图，计算齐墩果酸的峰面积RSD值。
2.2.4稳定性实验
取购自四川的川木通药材粉末，制备样品液，分别于提取后0、8、16、32、48h进样，记录并计算齐墩果酸的峰面积RSD值。
2.2.5回收率实验
将样品溶液稀释2倍，取20μL注入高效液相色谱仪，测定并计算含量。取3份上述溶液，每份0.5mL，向其中分别加入0.050mL，0.075mL，0.10mL齐墩果酸对照品，以甲醇补足，配制1.0mL的系列溶液，进行测定，计算回收率。