薄层色谱点样应注意的问题
仪器仪表网 · 2012-08-07 11:23 · 38853 次点击
点样是薄层色谱分析的重要环节,也是最费时间的一个环节,尤其是在定量路层色谱分析中,点样所需要的时间要占整个分析时间的30一60%。因此,有必要使点样技术最佳化。
总的要求是点样点尽可能集中,面积恒定,点样量准确。
点样技术的选择通常和样品体积、路层类型、分析目的(定性还是定量)、展开形式等有关。
应选用适宜的点样器。定容的微量吸移管比较方便,微量注射器(针头密平)或定体积毛细管点样器也可以。位置可在装有量尺的特制点样板上确定,也可自行测量。
在常规博层色谱法中,点样体积一般为0.5—5微微升,对于高性能薄层来说,样品体积多为50一500毫微升。如果采用多次点样法,点样量对以大一些,但总体积不可超过一次可转移量的三倍。样液不多时可一次点下,较多时可分次点下,要求一面点样一面催干,以免原点直径扩散过大。
大体积的稀样品溶液,最好以一个窄带状喷到板上。带状点样能改善分离,减少用光密度法定量时的系统误差。
在定性薄层中,可把样掐连续地点到起始线上,仍能显示出带状分离的优点。
在点式定员点样中,点样体积必须是相同的。如果要求样品量不同,则必须采用不同浓度的校正标准。但采用带状点样技术时不必这么做,它可以用不同体积的校准标准溶液而不会使定量精度受到损失。
如果所有样品都采用同样的点样装置(如毛细滴管),而样品配制中体积测定误差又能小于1%,则可得到较高的贡复性。如果体积测定装置不同,则要注意,计数应力求准确。
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