光学显微摄影中机械装置的调整方法及技巧
仪器信息网 · 2012-08-30 09:13 · 32125 次点击
光学显微摄影中机械装置的调整方法及技巧
机械装置的调整对做好显微摄影工作很重要,特别是抽筒的长度要确切,否则倍率不准,如用油镜头拍摄时抽筒要拉至170毫米处,拍摄不透明标本,要根据其厚度将抽筒拉出在190~250毫米范围内。对标本和盖片玻璃的厚度也有严格要求。
调焦时要注意先扭旋大螺旋于标本近处,然后自下而上移动,初步调清后,再微调小螺旋,直至最清晰。切不可自上向下对焦或是直接用大螺旋调焦。
移动聚光器时要依据亮度的需要。无论拍低位或高位,都要首先用低倍的接物镜对焦、对光。对光时把聚光器升到最高点,然后调整反光镜或光源光束,使最亮部分处于视野中心并使其亮度均匀,再转换所需要的高倍镜。调好焦点后,将聚光器下降至焦点与景深合适时为止。在使用油物镜时,要将集光器升至最高,与载片吻接,并点油使其与标本、物镜构成一个光具组。
显微摄影中还要注意光学与机械装置的配合,否则不是光线不均匀就是倍率不准确或是分辨率不强。所以,必须要求:
1.显微摄影装置必须放置平稳,组合照相装置、显微镜、光具组时要注意光路合轴。
2.将标本切片放在载物台上,用低倍调焦后作光束合轴调整。调整时先把虹彩光阑、光源光阑开到最大,集光器调至最高,在目镜上检视成像情况。如果太亮,可用深色滤色镜减弱强光。
3.将物镜调至所需要的倍率,收缩光源光阑和集光器光阑。集光器下降至适当位置,集光器高时,视场明亮、景深短;集光器低时,视场暗、景深长。由于在显微摄影中,景深长有可能将玻璃片或聚光器上的脏东西也呈现在画面上,所以长的景深也不宜采用。
4.成像面必须平行于标本平面,否则倍率不准、影像也会变形。