PCR常见污染原因

  仪器信息网 ·  2012-12-07 08:39  ·  14794 次点击
PCR常见污染原因:一、标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染,或标本放置时,由于密封不严溢于容器外,或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提取过程中,由于吸样枪污染导致标本间污染;有些微生物标本尤其是病毒可随气溶胶或形成气溶胶而扩散,导致彼此间的污染。二、PCR试剂的污染:主要是由于在PCR试剂配制过程中,由于加样枪、容器、双蒸水及其它溶液被PCR核酸模板污染。三、PCR扩增产物污染:这是PCR反应中最主要最常见的污染问题,因为PCR产物拷贝量大(一般为1013拷贝/ml),远远高于PCR检测数个拷贝的极限,所以极微量的PCR产物污染,就可造成假阳就可形成假阳性。还有一种容易忽视,最可能造成PCR产物污染的形式是气溶胶污染;在空气与液体面摩擦时就可形成气溶胶,在操作时比较剧烈地摇动反应管,开盖时、吸样时及污染进样枪的反复吸样都可形成气溶胶而污染.据计算一个气溶胶颗粒可含48000拷贝,因而由其造成的污染是一个值得特别重视的问题。四、实验室中克隆质粒的污染:在分子生物学实验室及某些用克隆质粒做阳性对照的检验室,这个问题也比较常见。因为克隆质粒在单位容积内含量相当高,另外在纯化过程中需用较多的用具及试剂,而且在活细胞内的质粒,由于活细胞的生长繁殖的简便性及具有很强的生命力,其污染可能性也很大。污染的监测一个好的实验室,要时刻注意污染的监测,考虑有无污染是什么原因造成的污染,以便采取措施,防止和消除污染。上海凌仪实业网址:www.lingyish.comwww.lingyi17.com上海凌仪实业有限公司简称凌仪实业是专业从事MRO工业品和仪器仪表的生产、代理和直销的分销商。拥有国内外众多知名工业领域产品和仪器仪表的中国区代理权限及一支优秀国际采购团队,为企业客户提供高性能的国产及进口工业仪器设备。通过整合市场供应链,实现节约采购成本,以满足客户需求,提高顾客效益。凌仪实业期望与众多行业客户携手,提供全方位的MRO工业品采购解决方案。

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