干热灭菌效果生物检测法
仪器仪表网 · 2012-12-13 09:45 · 53409 次点击
1.指示菌株:枯草杆菌黑色变种芽孢(ATCC9372),菌片含量为5.0×105cfu/片~5×106cfu/片。其抗力应符合以下条件:在温度160℃±2℃时,其D值为1.3~1.9min,存活时间≥3.9min,杀灭时间≤19min。
2.检测方法:将枯草杆菌芽孢菌片分别装入灭菌试管内(1片/管)。灭菌器与每层门把手对角线内,外角处放置2个含菌片的试管,试管帽置于试管旁,关好柜门,经一个灭菌周期后,待温度降至80℃时,加盖试管帽后取出试管。在无菌条件下,加入普通营养肉汤培养基(5ml/管),以36℃±1℃培养48h,观察初步结果,无菌生长管继续培养至第七日。
3.结果判定:若每个指示菌片接种的肉汤管均澄清,判为灭菌合格,若指出菌片之一接种的肉汤管混浊,判为不合格,对难以判定的肉汤管,取0.1ml接种于营养琼脂平板,用灭菌L棒涂匀,放36℃±1℃培养48h,观察菌落形态,并做涂片染色镜检,判断是否有指示菌生长,若有指示菌生长,判为不合格;若无指示菌生长,判为灭菌合格。