根据手性固定相和溶剂的相互作用机制，IrvingWainer首次提出了手性色谱柱的分类体系：
第1类：通过氢键、π-π作用、偶级-偶级作用形成复合物。
第2类：既有类型1中的相互作用，又存在包埋复合物。此类手性色谱柱中典型的是由纤维素及其衍生物制成的手性色谱柱。
第3类：基于溶剂进入手性空穴形成包埋复合物。这类手性色谱柱中最典型的是由Armstrong教授开发的环糊精型手性柱，另外冠醚型手性柱和螺旋型聚合物，如聚(苯基甲基甲基丙烯酸酯)形成的手性色谱柱也属于此类。
第4类：基于形成非对映体的金属络合物，是由Davankov开发的手性分离技术，也称为手性配位交换色谱(CLEC)。
第5类：蛋白质型手性色谱柱。手性分离是基于疏水相互作用和极性相互作用实现。
但由于市场上可选择的手性色谱柱越来越多，此分类系统有时很难将一些手性柱归纳进去。因此参考IrvingWainer的分类方法，根据固定相的化学结构，将手性色谱柱分为以下几种：
纤维素(Cellulose)型
蛋白质(Protein)型
配位交换(|Ligandexchange)型
冠醚(Crownethers)型
环糊精(Cyclodextrin)型
刷(Brush)型或称为Prikle型
大环抗生素(Macrocyclicantibiotics)型