银杏叶提取物改善学习记忆障碍的实验研究摘要为了探讨银杏叶提取物对中枢神经系统高级机能活动的作用,为临床应用银杏叶提取物治疗认知功能障碍提供实验依据,采用东莨菪碱所致老龄大鼠学习记忆障碍的拟老年性痴呆动物模型,以水迷宫和避暗实验等学习记忆行为训练及生化检测方法,观察用药前后动物学习记忆行为和海马乙酰胆碱及蛋白质含量的变化。实验结果显示:银杏叶提取物呈剂量依赖性显著改善实验动物的学习记忆能力(P<0105或P<0101),并显著增加海马脑区乙酰胆碱含量(P<0105或P<0101)。结果表明:银杏叶提取物可改善痴呆鼠学习记忆功能障碍。关键词银杏叶提取物，乙酰胆碱，学习记忆障碍银杏是一种具有多种药理作用的中药,从银杏叶中提取的主要药用成分为总黄酮类及银杏内酯等,简称为银杏叶提取物(extractsofginkgobilobaleaves,EGB)。近年研究显示,EGB是一种天然的自由基清除剂,可保护机体免受自由基引起的损害,改善脑循环障碍和神经元的功能,目前国内外已将EGB广泛应用于治疗冠心病和脑缺血,而关于EGB对认知功能等高级神经功能活动影响的实验或临床研究少见报道。本研究旨在探讨EGB对拟老年性痴呆大鼠学习记忆能力的影响,并初步研究其可能机制,为临床合理应用EGB提供一定的实验依据。1材料和方法1.1实验材料1.1.1实验动物:老年雄性Wistar大鼠,月龄约20～24月,体重650～820g(幼龄鼠喂养至老龄),老年性痴呆动物模型参考的方法建立。1.1.2药物:银杏叶提取物EGB(含总黄酮甙24%,总内酯60%);东莨菪碱。1.2实验方法1.2.1实验分组:将大鼠随机分为5组:正常老龄对照组、模型组、EGB小剂量组(75mgökg)、EGB中剂量组(150mgökg),EGB大剂量组(500mgökg),每组8只,采用灌胃给药,其中正常老龄对照组和模型组以相同体积的生理盐水灌胃,单次连续给药5d,于第6d测试水迷宫及避暗试验,测试期间停止灌药。实验动物饲养于(22±3)℃环境中,自由饮水,自然光照。1.2.2学习记忆行为训练与学习记忆能力评定:①分辨学习记忆训练与评估:采用水迷宫法测试药物对拟痴呆大鼠学习记忆能力的影响。以痴呆大鼠自水迷宫起点游至终点安全台所需时间和途中进入盲端的错误次数,作为衡量学习获得与记忆巩固能力的指标。②回避反应:采用避暗试验测试药物对拟痴呆大鼠学习、记忆能力的影响。以大鼠到达暗环境被动回避试验所需时间和电击次数,作为大鼠学习获得和记忆巩固能力的观察指标。1.2.3海马乙酰胆碱、蛋白质含量测定改进的方法,通过碱羟胺比色法测定海马的乙酰胆碱含量。海马蛋白含量测定方法如下:在完成各实验步骤后,将各组大鼠快速断头处死,取海马部位分别称重,加入Tris2HCl缓冲液(pH712)研磨匀浆,离心、过滤。Lowry法测定海马脑区的蛋白质含量。1.3统计学处理所有实验数据均用xq±s表示,数据处理采用t检验及方差分析,显著性水平为P<0105或P