流动相的保存期限和过滤问题

  Brad ·  2011-12-22 16:58  ·  44682 次点击
1.流动相的保存期限要具体问题具体分析,如果是有机相(或者纯水)则可以保留4-5天,当然肯定是保留时间越短越好了,在做实验时可以估计一下大概需要多少,不要过滤过多的有机相或纯水。如果是甲醇:四氢呋喃:乙腈:水/30:10:30:30,因为水相还是占相当大的比例,通常不宜超过1-2天。如果含缓冲盐的则最好当天用完,不要留置过夜,用不完也要倒掉,这是为了保护好机子起见,保存期限与缓冲盐的浓度有关系,越浓越不宜保留,总之,我认为缓冲盐溶液都不宜保留超过24小时,HPLC用缓冲盐时,由于泵头内的缓冲盐溶液存在高压析盐现象,析出的细小盐粒非常坚硬,它附着在蓝宝石活塞杆上,随着蓝宝石活塞杆的往复运动,容易产生划痕,并磨损密封垫,造成漏液等故障现象。如果你的液相有在线Seal-wash功能,则能有效的带走可能存在的缓冲盐结晶。通常缓冲盐的浓度在0.1mol或大于0.1mol时,必须使用该在线冲洗选项.
我认为一次性配制的缓冲盐不能用3天,无论是从为了防止长菌还是析出盐方面考虑。我觉得做液相也要事前作好各方面的计划,作到心中有数,这样即可以保护好机子设备,又能节省溶剂,不要为了图一时的方便而因小失大!
2、单纯的甲醇冲洗柱子的时候用了1周有必要需要重新超声脱气(如果你的机子有在线脱气功能的话则不必重新脱气,现在出的大多数机子有这功能),超声时间一般为10-15MIN。3、过滤流动相的时候,1张滤膜大概可以过滤多少毫升流动相并没有明确的规定,看情况而定,国外都是一次性的用,但在国内,由于国情的原因,大多数单位还是重复使用,我觉得只要自己认为脏了就可以换了,过滤过含缓冲液的滤膜就不宜再过滤不含缓冲液的流动相,当然如果经济不允许的话,就另当别论了。顺便给你点建小提示:A:请严格执行溶剂过滤。
B:请勿使用多日存放的蒸馏水及磷酸盐缓冲液
C:如果应用许可,可在溶剂中加入0.0001—0.001M的叠氮化钠.
D:避免使溶剂瓶暴露在直射阳光下,尽量使用琥珀色的溶剂瓶盛放水溶液或磷酸盐缓冲液。

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