3分钟-带你了解PH电极日常保养
让实验数据更精确,3分钟带你了解PH电极日常保养要点!
1.pH电极维护
电极日常维护可以延长电极的使用寿命。对于电解液可填充的电极,当电解液的液面低于样品液面,就需要填充电解液,这样可避免样品回流至电极中。电解液需要定期更换,例如一个月,这样可以确保电解液的新鲜,减少由于电解液从填充口处蒸发而产生的结晶。注意电极内部,特别是液络部处不要产生气泡,如果有气泡会导致读数不稳定。像甩动温度计一样,轻轻地甩动电极,可以去除气泡。
2.pH电极储存
电极需要储存在富含离子的水性溶液中。保持pH玻璃膜的敏感凝胶层含有大量水份和离子,更可靠地响应样品pH值。
短期储存
测量间隙或电极短时不用,电极需要储存在盛有专用的Inlab电极储存液,或电解液(如:3mol/L KCl)或缓冲液pH4或pH7的容器中。确保容器中电解液液面低于电极中填充液的液面。
长期储存
电极长期储存,需套上保湿帽,保湿帽内装有Inlab电极储存液,或与电极内同样的电解液,或pH4缓冲液,或0.1mol/L HCl。确认加液口封闭,减少电解液蒸发,损耗,避免在电极和液络部处形成结晶。电极切勿干燥存放或储存在蒸馏水中,因为这样会影响pH玻璃敏感膜,导致电极寿命减短。
尽管电极不正常的储存,可以通过再生来恢复性能,但以下的建议可以更好地确保电极状态。
温度探头
使用后清洗温度探头,干燥存放于包装盒内,避免损坏。
3. pH电极清洗
每次测量后用去离子水冲洗电极,切勿用纸擦拭电极。纸张粗糙的表面会刮划并损坏pH敏感玻璃上的凝胶层,并且会在电极上产生静电电荷。静电电荷会导致测量信号非常不稳定。电极被某些样品污染后,需要特殊的清洁护理。下面将进行详细地描述。
硫化银堵塞(Ag2S)
如果参比液含有银离子,并且样品含有硫化物,液络部将会被硫化银沉淀堵塞。可使用含有8%硫脲的0.1 mol/L HCl溶液清洗液络部。
氯化银堵塞(AgCl)
参比液含有银离子,与样品中的氯离子结合,产生的氯化银沉淀会堵塞液络部。可采用浓氨水溶液浸泡电极。
蛋白质堵塞
被蛋白质污染的液络部可通过浸泡在胃蛋白酶/HCI (含5%胃蛋白酶的0.1 mol/L HCl)溶液中数小时来清洗。
其它堵塞
如果液络部被其他物质堵塞,可尝试在含有水或0.1mol/L HC溶液的超声波水浴中处理。
4. pH电极的再生和寿命
即使电极得到良好的维护和适当地保存,在多次使用后电极性能仍会下降,此时电极玻璃敏感膜也许就需要再生了。将电极浸泡在电极活化液中可恢复之前的性能。电极活化溶液由极稀的氢氟酸组成,它可以腐蚀去一层极薄的玻璃膜,形成新鲜的表层。
当使用再生液时,不可浸泡电极超过1– 2分钟,否则敏感膜将被彻底腐蚀完,电极就损坏了。
在正确使用和维护的前提下,电极的寿命大致为1至3年。导致减短电极寿命的因素包括高温、测量极限pH值等。
5.pH测量 – 温度是重要组成
要精确测量pH值必须考虑温度的影响。下面一些简单有效的方法可以避免温度的负面影响,轻松获取精确稳定的结果。
自动温度补偿(ATC)
ATC尤其适用于常规体积的样品。
• 含温度探头的pH电极在测量得到稳定信号后,仪表会自动补偿温度对pH值的影响。ATC适用于体积大于10mL的样品。
• 所有型号名称包含“Pro”的Inlab电极,如Inlab Micro Pro、Inlab Science Pro、Inlab Expert Pro等,都包含内置的温度探头,无需担心设置错误的温度或没有设置温度。
• 如果使用不含内置温度探头的电极,推荐搭配使用单独的温度探头。
手动温度补偿(MTC)
MTC同样非常准确,但比较费时。
• 如果已知被测样品的温度(如:在恒温的空调房间,或样品刚从冰箱内取出),在仪表的测量设置中手动输入温度,从而获得正确的pH测量值。
• 如果被测样品的温度不同,MTC会花更多时间,因为更换样品时需要重新输入对应的温度。
样品温度不等于电极温度
对于少量的样品,电极需要长时间达到温度稳定,因此电极温度往往被当成样品温度。样品的体积相比电极的体积要小很多,因此需要等待足够的时间以确保你获得的温度是真实的样品温度。最好的办法是让电极和样品放置的同一个地方,例如同时放置在冰箱、恒温箱或室温下。这样,pH电极、参比电极和样品的温度相同,可以确保最精确的测量。
6.避免污染电极
电极测量样品时可能会被污染,也许由于样品遗留或微生物污染。如果没有采用Inlab电极,而是采用传统电极测量TRIS缓冲液或蛋白质样品,参比液与样品发生化学反应也会引起污染。
避免TRIS缓冲液污染
准确的pH测定对配制缓冲液非常重要。在生物研究中广泛应用的TRIS缓冲液,会损坏pH测量装置。
TRIS为什么会损坏电极?
测量TRIS缓冲液时,传统pH电极的参比液(含有Ag+)与TRIS缓冲液起化学反应引起液络部堵塞。同样,如果溶液中含有蛋白质,比如DSA(牛血清白蛋白),也会引起堵塞。电极表现为读数缓慢和波动,甚至得到完全错误的结果。
用酶清洗液消除生物污染
Inlab Power、Power Pro、Viscous和Viscous Pro可以进行高温灭菌。先用RNase (RNA酶)和DNase (DNA酶)清洗液清洗电极,可显著去除生物污染。
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